超声造影引导明胶基深部创伤注射止血机理的研究

据WHO预测2020年创伤将上升至死亡原因的第2位，伤后快速有效地现场止血治疗是挽救伤员生命的关键。本课题组在超声造影引导脏器创伤出血的诊治方面进行了系列研究，发表相关论文58篇，其中SCI论文11篇。研究发现目前使用的实质创伤注射止血剂抗张强度小，弥散性差，而明胶基止血剂具有抗张强度高、组织相容性好等特点，已广泛应用于临床，主要为喷洒类、绷带、海绵等止血剂型，尚不能用于深部实质脏器注射止血治疗。本课题通过改变明胶基的流动相、羧基化，并利用纳米技术使其纳米化，研究其深部注射的可行性及促进止血作用的机制；采用细胞模型，通过MTT、Western blot、ELASA等方法研究其细胞形态、增殖及分化周期、蛋白表达及细胞凋亡因子的表达；采用Ⅲ～Ⅳ级创伤动物模型，通过测定各种血化验指标、蛋白表达，探索其参与或促进机体组织正常修复和局部微血管重建的情况，为实现明胶基注射止血治疗深部创伤提供理论依据。

本项目旨在通过改变明胶基的流动相、羧基化，并利用纳米技术使其纳米化，自制出明胶基止血剂（HIGM），采用III-IV级肝创伤的动物模型，探索超声造影引导HIGM的止血效果及促进机体组织正常修复的情况，为实现HIGM治疗深部创伤及活动性出血提供理论依据。取得的主要研究进展和成果如下：.（1）通过化学方法使明胶羧基化，并将明胶与钙离子进行充分交联，采用钠米技术使其纳米化，从而得到明胶交联物的明胶基颗粒，研究发现：明胶基颗粒与血液中的凝血因子发生交联反应，促进局部凝血。.（2）建立预干扰后干扰细胞模型，采用MTT法和倒置光镜动态观察细胞生长状态和不同分子量不同质量分数明胶对细胞相容性的影响，研究表明：采用预干扰模型对较高分子量明胶细胞实验较适合，较高分子量明胶可能对微血管在一定时间内的修复与重建有促进作用。.（3）对HIGM进行体外试管实验，HIGM组凝血时间明显短于空白组和凝血酶组，凝血块重量也明显沉于空白组和凝血酶组，具有明显统计学差异（P <0.01）。.（4）对于大鼠肝创伤模型，HIGM组止血时间（129.3±14.0s）明显短于凝血酶组（324.7±52.22s，P <0.01），尽管长于医用胶组（5.2±1.0s），但是不同观察时间（3天、6天、9天）动物腹腔粘连和药物吸收情况却明显优于医用胶组。.（5）在前期实验中，HIGM在大鼠肝脏创伤治疗中虽然能得到有效的止血，但其止血时间大约维持在2分钟左右，远远超过医用吻合胶的瞬间止血时间，因此我们对原配伍进行了改进和调整，改进后的HIGM对犬的肝创伤模型，其止血时间（1.20 ± 0.33min）和出血量（47.22 ± 8.61ml），明显少于凝血酶组和生理盐水组（P <0.001）。治疗后30分钟，HIGM组的心率及血压均恢复至创伤前状态，且血常规参数与治疗前相比无任何统计学意义。剖腹探查HIGM组创口充填完整，无出血，无局部炎症、感染和粘连形成。.（6）在进一步的中短期观察中，超声造影显示HIGM组创伤灶在第3天明显缩小，第7天肝脏灌注均匀，病灶完全消失，而且在10天的随访中未发现有任何腹腔积液形成。对于肝功能指标尽管在早期略有升高随之逐渐下降，但在观察第10天，均恢复到正常范围。