BDNF-AS和LINC00678共有编码区遗传变异与青少年非自杀性自伤行为的关联及机制

It is reported that genetic variation is an important risk factor for non-suicidal self-injury (NSSI) among adolescents, however, there is no study have been explored the association between intron genetic variation and NSSI, neither their action mechanism. Most recently, it has been shown that non-coding RNA (ncRNA), especially long non-coding (lnc) RNA, which is transcribed by introns, play an important role in development and prognosis of disease through regulating gene expression. Results from the whole genome microarray and bioinformatics analysis have shown that two introns, rs11822590 and rs11825029, in brain-derived neurotrophic factor (BDNF) gene, may effect NSSI susceptibility through influencing the functions of lncRNA BDNF-AS and LINC00678, which encoded by the introns in BDNF. Therefore, the current study aims to estimate the association between rs11822590 and rs11825029 and NSSI with a large sample of population, and to explore the molecular mechanism of intron genetic variation affect BDNF-AS and LINC00678 regulate BDNF expression in post transcriptional level, RT-PCR, RNA Pull-down, western-blot and other molecular biological techniques will be used in the process of data collection. The current study may shed light on the genetic mechanism of NSSI and provide new targets for the prevention and diagnosis of NSSI.

众多研究表明遗传变异是非自杀性自伤行为(NSSI)的重要影响因素，而内含子遗传变异与NSSI的关联及作用机制未见报道。近年，由内含子转录的非编码RNA，特别是长链非编码(lnc)RNA调控基因表达而影响疾病发生及预后受到重点关注。我们最近通过全基因组芯片和生物信息学分析，推测脑源性神经营养因子(BDNF)基因内含子rs11822590和rs11825029可能通过影响lncRNA BDNF-AS和LINC00678的功能影响NSSI的易感性。本课题拟通过大样本人群在验证rs11822590和rs11825029与NSSI关联的基础上，运用RT-PCR、RNA Pull-down、Western Blot等分子生物学技术探索其影响BDNF-AS和LINC00678从转录后水平调控BDNF表达的分子机制，这一研究可能会在揭示NSSI的遗传病因机制上有所突破，并为NSSI预防和诊断提供新靶点。

目的：探讨lncRNA BDNF-AS 和 LINC00678 共有编码区域rs11822590 和 rs11825029 多态性与青少年 NSSI 的关联及机制，为青少年NSSI风险的预测提供科学依据。主要研究内容有：.(1)探讨了我国青少年NSSI的流行现状和影响因素；分析了网络成瘾和NSSI的相关性；分析了童年期父母与子女分离对青少年NSSI的影响；.(2)探讨了rs11822590和rs11825029多态性与青少年NSSI的相关性。.(3)探讨了rs11822590和rs11825029多态性影响NSSI易感性的两种机制。.主要研究结果和意义.(1)我国青少年NSSI的标化患病率为12.2%。不同性别、民族青少年NSSI患病率存在显著性统计学差异。该研究首次描述了我国青少年NSSI的现状，为NSSI防控奠定了基础。.(2)网络成瘾与青少年NSSI均显著性相关，网络成瘾评价可用于NSSI的早期识别，本研究结果可能对NSSI临床诊断和早期干预有重要的指导意义。.(3)童年期父母与子女的分离会显著增加青少年NSSI的发生风险。该研究结果对于制定或完善留守儿童关怀和保护政策可能具有重要的意义。.(4)rs11822590和rs11825029多态性与青少年NSSI显著相关，相对于野生型CC+TT， CC+CC，AA+TT和AA+CC的OR和95%CI分别为2.40（1.44-4.00），1.67(1.06-2.63), 和3.24 (1.80-5.83)。人群表达实验表明，rs11822590和/或rs11825029多态性均可导致BDNF表达下调。.(5)细胞实验结果表明，相对于野生型CC+TT，CC+CC、AA+TT和AA+TT的神经胶质瘤细胞系BDNF-AS与mRNA结合量显著降低；CC+CC降低了BDNF-AS/LN0678与miR-3121-3P结合的能力。