保健灸对老年小鼠“长寿基因”SIRT1的调控

So far, the whole society faces a big problem of the growing population aging.the Sate Council issued the development of "China cause of aging of the Twelfth Five Year Plan"，to deploy the important tasks of the health care in elderly patients. moxibustion was effective as an antiaging therapy and modern research confirmed it.while, its theory is not perfect. Administration of traditional Chinese medicine has made traditional Chinese medicine prevention and health care program, to support and guide the Chinese preventive practice of Health Science development.This study focuses on moxibustion for health care. It would import the "longevity gene" SIRT1, which is the therapy target for aging and aging related diseases treatment. We quasi long term intervention in aged mice, with strictly control of moxa smoke concentration, to observe body weight, blood glucose, blood lipid, changes of learning and memory activities and tumor rate and survival to evaluat the health care efficacy. Using advanced biotechnology, thousands of genes and a number of regulatory pathways such as FOXO3α, P53,NF-қB, PPAR, PGC-1α, would be identified to improve the mechanism of moxibustion in health care, and to provide scientific and technological support for society recognition of health care with TCM, and provide new clues for therapeutic target for disease prevention..

人口的老龄化是21世纪全球的社会难题。国务院制定了《中国老龄事业发展“十二五”规划》，布署了开展老年病的预防保健等重要任务。艾灸对老年病的预防保健（治未病），有确切的疗效，但其理论构建尚不完善。中医药管理局也制定了中医预防保健的纲要，以支撑和引领中医预防保健科学规范发展。.本课题以保健灸为切入点，引入国际老龄化和老龄化相关疾病的治疗靶点-“长寿基因”SIRT1，拟长期干预老年小鼠，严格监控艾烟浓度，观察小鼠的体重、血糖、血脂、学习记忆、活动等变化，并计算小鼠的患瘤率和生存期，评价艾灸的预防保健功效；采用先进的生物技术，对SIRT1蛋白和SIRT1及其数条调控通路中的数千条基因如FOXO3α、P53、NF-қB、PPAR、PGC-1α等，进行高效的筛选和规模化的识别，完善保健灸的防病保健的机制，为中医防病保健的社会认可提供科技支撑，为寻找中医防病保健的治疗靶点提供线索。

老年病是目前医学领域的重要课题。老龄化导致一系列退行性疾病的发病率和死亡率增加，带动庞大的医疗费用支出。国务院制定了《中国老龄事业发展“十二五”规划》，布署了开展老年病的预防保健等任务。保健灸可防病保健延缓衰老。本课题以保健灸为切入点，长期干预老年小鼠，开展保健灸对老年小鼠的调控机制研究。方法：将自然衰老小鼠随机分为艾灸组与对照组。艾灸组小鼠关元穴剃毛，温和灸，10min/次。对照组：穴区剃毛，固定器固定10min／次，1次／2天，共30次。观察小鼠的体重、血糖、学习记忆（水迷宫实验、黑白箱电击实验）、活动状态（旷场实验）、运动能力（小鼠疲劳转棒实验）、患瘤率和生存期，应用免疫组化的方法检测SIRT1、P53、 PPAR a、PPAR r相关指标，并采用数字基因表达谱测序研究基因的表达差异情况。结果: 艾灸组与对照组小鼠体重、血糖、学习记忆等方面无明显差异。艾灸组小鼠生存期（681.60±82.04）长于对照组（661.60±79.78），患瘤率（37.5%）低于对照组（0%）。两组小鼠均出现行动迟缓、步数减少，点头数降低，对外界缺乏兴趣。艾灸组小鼠水迷宫实验中的游泳速度（21.17±0.946）高于对照组（19.00±1.517），艾灸组小鼠爬棒时间（167.714±92.594）长于对照组（54.200±28.440）。免疫组化结果提示艾灸组与对照组PPAR r无明显差异，PPAR a无明显差异，艾灸组SIRT 1表达量高于对照组（P=0.025），P53含量低于对照组（P=0.037）。数字基因表达分析结果提示，获得了145百万原始Tags数据，140 million (96.55%) 为高质量的原始Tags数据。得出5种差异表达基因分别为Gm 6563、Gm 8116、Rps26-PS1、Nat8f4和Igkv3-12。基因本体分析采用GO seq R软件包，并对与翻译、细胞核mRNA输出、mRNA转运、核体、乙酰转移酶活性等相关的差异表达基因进行功能注释，得出核糖体是最显著富积的通路。结论：保健灸防病保健延长小鼠的生存期，降低患瘤率，保健灸通过上调SIRT1，抑制p53介导的细胞凋亡提高细胞存活。艾灸后p53去乙酰化，p53 mRNA的表达下调，转录活性降低，从而抑制了细胞的凋亡。核糖体是最显著富积的通路，生存期尚需要大样本的重复实验再次进行验证。