PnNOS基因修饰的自体脂肪源性干细胞移植治疗勃起功能障碍

阴茎神经源型一氧化氮合酶（PnNOS）是治疗勃起功能障碍（ED）重要的目的基因。然而，目前所用的病毒和非病毒载体均不同程度存在着移植排斥反应难以避免；转染的基因靶向性不高；体内转染过程无法进行调控等不足。为了解决这些难题，基因修饰细胞移植技术应运而生。而基因修饰细胞移植技术的关键是找到理想的细胞载体。本项目首次以脂肪源性干细胞（ADSCs）作为ED基因治疗的细胞载体，PnNOS基因修饰ADSCs。在整体、离体、细胞和分子水平，探索PnNOS基因修饰的ADSCs（ADSCs－PnNOS）自体移植治疗ED的效果、时效关系及其作用机制等问题。有望为基因修饰细胞移植技术治疗ED找到良好的细胞载体，改进ED基因治疗的方法和提高治疗效果，并为临床应用基因修饰干细胞移植治疗ED打下基础，具有重要的理论价值和应用前景。

阴茎神经源型一氧化氮合酶（PnNOS）是治疗勃起功能障碍（ED）重要的目的基因。为了解决以前的基因治疗的不足，基因修饰细胞移植技术应运而生。我们首次以脂肪源性干细（ADSCs）作为ED 基因治疗的细胞载体，构建了PnNOS 基因修饰 ADSCs。.为此，我们在整体、离体、细胞和分子水平，探索 PnNOS 基因修饰的 ADSCs（ADSCs-PnNOS）自体移植治疗ED 的效果、时效关系及其作用机制等问题。得出以下结果：（1）成功构建PnNOS基因修饰的ADSCs，PnNOS基因在ADSCs中稳定持久的表达；（2）ADSCs-PnNOS通过共培养可以提高阴茎海绵体内皮细胞内NOS水平（3）ADSCs-PnNOS通过共培养激活阴茎海绵体平滑肌细胞内NO-cGMP通路，提高了海绵体平滑肌细胞内cGMP水平，从而降低游离Ca2+水平；（4） ADSCs-PnNOS自体移植可通过提高糖尿病ED大鼠海绵体内cGMP水平，旁分泌更多的VEGF、IGF-1，减少DMED的免疫炎症反应，减少免疫炎症反应，改善糖尿病ED大鼠的勃起功能，且其治疗效果较单纯ADSCs效果更佳。.本研究基本达到预期效果，ADSCs-PnNOS通过激活NO-cGMP通路增加了cGMP的含量，提高了NOS的活性，从而改善糖尿病ED大鼠的勃起功能。在此基础上，我们更深入的探讨了其机制，增加了ADSCs旁分泌因子的检测。