免疫耐受在牙周炎发生发展中的作用和机制研究

牙周炎是严重危害口腔健康的一种慢性感染性疾病。在其漫长的病程中，可能因为先前的细菌或毒力因子刺激而使机体对后续刺激的反应性减弱，即产生免疫耐受。这种改变能防止过度的免疫损伤，但也可能降低宿主的防御反应，不利于机体有效清除入侵细菌。本研究以人单核细胞THP-1为研究对象，采用分子生物学和细胞生物学技术，检测牙龈卟啉单胞菌（P.gingivalis）内毒素和大肠杆菌内毒素重复刺激诱导细胞耐受后，多种细胞因子表达水平的改变；分析与细胞耐受相关的Toll样受体2，4（TLR2，4）信号传导机制；探讨γ-干扰素对细胞耐受的调控作用；并进一步观察P.gingivalis标准菌株、临床分离株、及中、重度慢性牙周炎患者的龈下菌斑诱导的耐受对多种细胞因子和TLR2，4表达水平的影响。本研究首次系统的对免疫耐受在牙周炎发生发展中的作用和机制进行探讨，有助于进一步揭示牙周炎的发病机制，为预防及治疗提供理论依据。

在牙周炎的漫长病程中，可能因为先前的细菌或毒力因子刺激使机体对后续刺激的反应性减弱，产生免疫耐受。这种改变能防止过度的免疫损伤，但也可能降低宿主防御反应，不利于机体有效清除入侵细菌。. 本研究检测了牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis, P.gingivalis）内毒素（lipopolysaccharides, LPS）重复刺激人单核细胞THP-1后，多种细胞因子表达水平的改变；分析了与之相关的Toll样受体2，4（Toll-like receptor 2，4，TLR2，4）信号传导机制和调控机制；观察了P.gingivalis标准株、临床分离株及中、重度慢性牙周炎患者的龈下菌斑诱导的耐受对多种细胞因子和TLR2，4表达水平的影响；并进一步探讨了内毒素耐受对人牙龈上皮细胞（human gingival epithelial cells, HGECs）分泌多种细胞因子的影响，以及年龄对细胞耐受的影响。. 结果发现，P.gingivalis LPS诱导THP-1细胞耐受后，炎症因子TNF-α、IL-1ß，抗炎因子IL-10和趋化因子IL-8表达水平均有不同程度改变，这种改变可能与信号分子TLR2、SOCS1和IRAK-M的表达改变有关。IFN-γ预处理有助于促进耐受细胞分泌TNF-α和IL-1β，因而可能具有干预内毒素耐受的作用。. P.gingivalis标准株、临床分离株以及慢性牙周炎患者的龈下菌斑诱导的耐受能够抑制巨噬细胞分泌TNF-α，但没有观察到耐受前后TLR2，4表达水平的明显变化，推测这种耐受可能与TLR2，4下游信号分子有关。. 在此基础上进行的拓展研究发现，P.gingivalis LPS耐受的牙周组织细胞HGECs分泌IL-6和IL-8的能力明显降低，这种改变可能与TLR2表达水平降低有关。动物实验发现，内毒素耐受存在增龄性变化，来自高龄个体的巨噬细胞耐受效应较弱。. 本研究首次系统的对P.gingivalis全菌及其LPS诱导的单核/巨噬细胞耐受在牙周炎发生发展中的作用和机制进行了初步探讨，有助于进一步揭示牙周炎的免疫学机制。. 通过本项目的研究，已发表文章4篇（SCI收录1篇），已接收文章2篇（SCI收录1篇），已培养硕士研究生2名，正在培养硕士研究生2名。