lncRNA-FAM225A在鼻咽癌转移中的作用和分子机制研究

In nasopharyngeal carcinoma (NPC), about 70% of the treatment failures are ascribed to distant metastasis. The accuracy of current clinical TNM staging system to predict distant metastasis is only 63.6%. How to integrate molecular indicators with clinical TNM staging system to screen out patients with high risk of metastasis and guide individualized therapy is a challenge to reduce distant metastasis. To date, long noncoding RNAs (lncRNAs) has been proved to play important roles in tumor metastasis. Our preliminary studies revealed that ① lncRNA-FAM225A was significantly upregulated in NPC tissue samples and cell lines, which was also validated by quantitative PCR; ② migration and invasion assays suggest that knockdown of lncRNA-FAM225A inhibited the migration and invasion of NPC cells, however, the mechanism remains unknown; ③ survival analysis indicted that patients with high level of lncRNA-FAM225A expression suffered poor distant metastasis-free survival and overall survival. In this project, we will ① elucidate the function and molecular mechanism of lncRNA-FAM225A in NPC metastasis; ② validate the predictive value of lncRNA-FAM225A in NPC metastasis. This research will provide a potential novel target and molecular indicators for individual therapy of NPC patients.

远处转移是鼻咽癌治疗失败的主要原因（占70%），使用现行的TNM临床分期来预测远处转移的准确性仅63.6%。如何结合分子指标筛选出高转移风险的病例，并予以个体化治疗，是降低远处转移面临的挑战。lncRNA被证实在肿瘤转移中起着重要作用。我们的前期研究提示：①采用lncRNA芯片能够筛选出在鼻咽癌组织和细胞中均显著高表达的lncRNA-FAM225A；定量PCR也验证了该结果；②迁移和侵袭实验提示敲减lncRNA-FAM225A后可抑制鼻咽癌细胞的迁移和侵袭能力，但具体作用机制不明；③小样本生存分析发现，lncRNA-FAM225A表达水平高的鼻咽癌患者，无远处转移生存和总生存均较差。本课题拟在上述基础上：①阐明lncRNA-FAM225A在鼻咽癌远处转移中的具体作用及分子机制；②在大样本中验证lncRNA-FAM225A对远处转移的预测价值，为鼻咽癌的“个体化”治疗提供新的靶点和分子指标。

鼻咽癌（NPC）是一种独特的头颈癌，主要累及鼻咽上皮内膜。鼻咽癌在东南亚占主导地位，特别是在中国，每年占全球新发病例的40%。通过磁共振成像、调强放疗和同步放化疗的联合使用，鼻咽癌患者的预后得到了显著改善。然而，大约30%的鼻咽癌患者最终发展为复发或/和远处转移，并且对这些患者的疗效不令人满意。因此，在预测性生物标志物的识别和潜在机制的澄清方面的进展对于开发更个性化的鼻咽癌患者治疗至关重要。.本课题在前期研究的基础上，基于微阵列分析，我们鉴定了384个失调的lncRNA，其中FAM225A是NPC中上调最多的lncRNA之一。通过qPCR，我们发现FAM225A高表达与鼻咽癌生存率低显著相关。N（6）-甲基腺苷（m6A）免疫沉淀（MeRIP）证实FAM225A中高度富集m6A修饰，该修饰能增强FAM225A的RNA稳定性。CCK-8、Transwell小室实验、划痕实验和体内动物实验均明确FAM225A作为致癌lncRNA，能够促进NPC细胞增殖、迁移、侵袭、肿瘤生长和转移。在机制上，我们利用qPCR、western blotting、荧光素酶报告基因实验、荧光原位杂交、RNA 免疫沉淀等实验，证实FAM225A可作为分子海绵，以竞争内源RNA（ceRNA）的方式吸附miR-590-3p和miR-1275，导致其靶整合素β3（ITGB3）的上调，并激活FAK / PI3K / Akt信号以促进NPC细胞增殖和侵袭。综上所述，我们的研究揭示了一种潜在的ceRNA调控途径，其中FAM225A通过与miR-590-3p和miR-1275结合来调节ITGB3表达，最终促进鼻咽癌的肿瘤发生和转移。本研究阐明了lncRNA FAM225A在鼻咽癌（NPC）中的临床意义及其参与鼻咽癌发展和进展的调控机制，为新的预后指标和有希望的治疗靶点提供了新的预后指标和有希望的治疗靶点，该研究成果发表于Cancer Research (IF 13.312)杂志，为ESI高被引论文，被AACR出版社评为该期刊年度最具影响力的研究之一。.研究完成了申请书承诺的全部预期成果，发表SCI论文8篇，培养研究生10名，举办各类学习班推广研究成果。