循环microRNA 208在心肌损伤诊断中的作用

心肌损伤的早期诊断极为重要，而现有的心肌损伤生物标志物均存在各自的局限性，相关研究显示，microRNA有望成为一类新的可靠的生物标志物。其中，miR-208是目前报道心肌特异性最高的microRNA，其与心肌损伤的关联在动物实验和尸检结果中均已证实。本课题将依托阜外心血管病医院丰富的患者资源，首次以心肌损伤患者和正常人群为研究对象，系统验证miR-208在心肌损伤诊断中的作用。包括建立血浆miR-208浓度的检测方法并验证方法的稳定性、统计正常人群血浆miR-208浓度分布、计算miR-208作为心肌梗死标志物的特异性和敏感性以及miR-208诊断微小心肌损伤的灵敏性等。其中在研究miR-208诊断心肌梗死的特异性方面，着重分析心肌肥厚、心律失常及肾功能障碍的影响。如能达到预期实验结果，本课题将推动miR-208成为一个全新的可靠的心肌损伤标志物，从而为心肌损伤的准确诊断提供有力支持。

本课题前期目标是检测miR-208在心肌损伤诊断中的作用，我们重点对心肌梗死患者和健康人的血浆中miR-208a含量进行检测，均未能检测到。miR-208a的血液含量较低，未能检测，而miR-208b的心脏特异性稍差，所以miR-208作为心肌梗死的标志物还存在很大的局限性，故我们申请对此课题进行调整，研究炎症因子和炎性相关循环microRNA在冠脉不稳定斑块中的作用。冠脉不稳定斑块的破裂是导致急性心肌梗死的主要病理基础，近年来，炎症在冠状动脉粥样硬化斑块进展过程中的作用引起广泛关注。目前尚缺乏有效的不稳定斑块的无创识别技术，我们分别从microRNA和蛋白两个水平进行了不稳定斑块炎性标志物的研究。. 本课题前期对心梗标志物miR-208a的研究，我们建立了稳定的循环血miRNA提取及Real-time PCR的扩增方法。本课题后期我们以冠脉CT诊断为依据，将外周血标本分组为冠脉正常组、钙化斑块组和非钙化斑块组。通过大量文献筛选了不稳定斑块相关炎性因子Adiponectin、Eotaxin、Pentraxin-3等，经ELISA检测验证后发现，Adiponectin可预测斑块的存在与否，且与hs-CRP有一定相关性；同时通过候选基因的方法筛选到miR-16、miR-21等6种miRNA在不同组别中差异表达，经大样本人群real-time PCR验证，锁定差异表达的miR-21，ROC分析表明其对冠脉不稳定斑块有一定的识别能力。. 综上所述，本课题通过寻找血清学标志物，为不稳定斑块的无创识别技术的发展提供方向。我们首次将炎性miRNA检测引入冠脉不稳定斑块的分子诊断领域，为不稳定斑块的早期预警提供了新的思路，同时利于心梗的早期预防。我们在此研究基础上申请到1项新的国自然基金（81371887）；发表论文1篇，国际会议摘要2篇，1篇作壁报展出，1篇SCI论文在投。