循环MicroRNA在口腔鳞状细胞癌早期诊断和治疗中的功能及机制探讨

口腔鳞状细胞癌（OSCC）是严重危害人类健康和生活质量的口腔疾病，早期诊断和治疗是控制病情、提高生存率的关键环节，而可靠的肿瘤标志物的应用是一项积极有效的应对措施。研究表明循环微小RNA (miRNAs) 具有高特异性、灵敏度及稳定性，是一类极具潜力的无创肿瘤分子诊断标志物。近年来它们在其他肿瘤研究中进展迅速，但在OSCC诊治中鲜有报道。因此本课题旨在前期工作基础上,深入发掘口腔肿瘤相关循环miRNAs的特殊表达模式，优选可用作肿瘤标志物的若干循环miRNAs，并通过大量临床标本检测，验证其在OSCC患者早期诊断及治疗中的检测效能和临床价值，为建立循环miRNAs表达谱用于OSCC患者的肿瘤分期、转移、疗效监测等方面的临床标准奠定基础。同时深入系统研究相关miRNAs的生物学功能，明确其相应的靶基因及信号转导通路，探讨其致癌机理，为OSCC患者的治疗及抗癌新药的研发提供新的靶点和研究思路。

口腔鳞状细胞癌（OSCC）是严重危害人类健康和生活质量的口腔疾病，早期诊断和治疗是控制病情、提高生存率的关键环节，而可靠的肿瘤标志物的应用是一项积极有效的应对措施。研究表明循环微小RNA (miRNAs) 是一类极具潜力的无创分子诊断标志物。近年来它们在其他肿瘤研究中进展迅速，但在OSCC诊治中鲜有报道。因此本课题旨在深入发掘OSCC相关循环miRNAs的特殊表达模式，优选可用作肿瘤标志物的若干循环miRNAs，并验证其在OSCC患者诊疗中的检测效能和临床价值。我们严格按照研究计划开展了相关工作:(1) 收集完成项目所需的大规模病例标本，并建立完整的病例资料档案。（2）采用miRCURY™ LNA expression array芯片技术初步确定反映OSCC生物学特性的循环miRNAs表达谱型，迄今尚未见相似报道。（3）建立并优化了一整套基于实时荧光RT-PCR方法检测血浆miRNAs的方法学体系，并创新性改进了相对定量法检测的对比参照体系；该方法使用标准统一，可比性强，适合临床推广，是本研究的创新价值体现及亮点之一。（4）揭示四种差异表达的miRNAs (miR-4677、miR-125b、miR-1265和miR-3682) 在OSCC患者外周血中的表达规律，并完成诊断性能评估。结果表明miR-125b和miR-4677都是优良的OSCC辅助诊断标志。（5）为提升诊断效能，我们将上述4种miRNAs进行不同组合，通过Logistic回归，再评估联合检测后的诊断效能。结果显示联合检测后诊断敏感度和特异性均有大幅提升（均超过95%），基本可满足OSCC的临床辅助诊断所需。至此，我们首次筛选和确立了用于OSCC实验室诊断的外周血循环miRNAs诊断模式，该结果填补了该领域的研究空白。（6）通过组织和细胞学的对比研究进一步验证上述几种差异表达miRNAs，为它们在OSCC患者外周血中的表达规律提供了必要支持。总之，本研究在众多原创发现基础上，将分子诊断技术有效应用于临床诊疗，为OSCC的早期诊断提供了全新的分子诊断标志，提升了OSCC的诊疗水平，具有广泛的临床应用价值。