HAPC藏医多血症的生物学基础及藏药三果汤散干预研究

高原红细胞增多症（HAPC）是我国高原地区的常见病与多发病，严重威胁着生活和工作在高原地区人们的身体健康。藏医药作为世界公认的传统高原医学，具有治疗HAPC独特的优势。本课题在前期973和国家自然科学基金项目等基础上，提出"HIF-1α基因表达、特异性代谢标志物可能是HAPC藏医多血症的重要生物学基础"的假说。以藏医药理论为指导，拟通过以健康人为对照的临床研究（选择HAPC的藏医多血症为患者组）和动物实验（低压舱大鼠模型），结合整体症状体征与生化法检测血液代谢参数，从体征指标-血液代谢参数-HIF-1α细胞因子-代谢物谱及代谢标志物四个层面，采用基因组学与代谢组学技术，探索HAPC藏医多血症的HIF-1αmRNA表达及生物代谢标志物差异。并分析藏药三果汤散干预前后体液中代谢物（包括药物及其代谢物、内源性代谢物）全谱的动态变化，阐释病证结合的HAPC藏医多血症的生物学基础及科学内涵。

高原红细胞增多症（HAPC）是我国高原地区的常见病与多发病，严重威胁着高原地区人们的身体健康。藏医药具有治疗HAPC独特的优势，藏药三果汤散在藏医临床上可用于高原疾病的治疗。本课题以藏医药理论为依据，提出“HIF-1α基因表达、特异性代谢标志物可能是HAPC 藏医多血症的重要生物学基础”的研究假说。通过以HAPC 的藏医多血症为患者组和动物实验（低压舱大鼠模型）来阐释病证结合的HAPC藏医多血症的生物学基础及科学内涵。. 本课题组在藏医药理论体系的指导下，通过三年的研究，全面完成了项目任务书的要求，主要取得以下成果：(1)结合系统生物学的思路和现代分子生物学的方法，观察了藏药复方新三果汤抗疲劳、抗缺氧及防治慢性缺氧导致的高原红细胞增多症动物模型的作用及机制，证实了新三果汤作用机制可能与作用于“活性氧—缺氧诱导因子-1α—促红细胞生成素通路”有关；(2)采用代谢组学的研究方法，以平原空白大鼠为研究对象，分别以GC-MS，HPLC为分析手段，分析藏药三果汤散干预前后血液中代谢物的变化情况，采用分类特征变量找到了6种潜在生物标记物，鉴定出来的有亮氨酸和十八酸；以高原红细胞增多症动物模型的大鼠为研究对象，分析藏药三果汤散干预前后动物血液中代谢物全谱的动态变化，发现了8种潜在生物标记物，分别为硅烷、N-甲基-N-甲氧羰基、2-氯辛烷、2、4-二叔丁基苯酚、十七烷、2,2,4-三甲基-1、十七烷、Tazettine、Oleanitrile；(3)以藏药三果汤散为研究对象，采用三种手段，初步确定了没食子酸、柯里拉京是三果汤散抗氧化有效成分；并建立了HPLC法测定藏药三果汤散、余甘子中没食子酸和鞣花酸含量的方法；对毛诃子乙酸乙酯部位进行了化学成分研究，共分离八个化合物；(4)通过对藏区慢性高原病患者的范围以及诊治方法的调查，对拉萨地区的病人采集血样，根据临床统计表明，HAPC患者其血液中各项生化指标经放血前后有明显差异。经过放血治疗后患者的头痛、紫绀有所缓解，血红蛋白浓度降低。. 本课题通过现代分子生物学的方法和代谢组学的手段，探索了HAPC 藏医多血症的HIF-1αmRNA 表达及生物代谢标志物差异，建立了民族医药防治慢性高原病的有效性评价和作用机制研究的新方法，进一步阐释了三果汤散治疗HAPC的科学依据，为寻找防治高原红细胞增多症的新途径提供一定实验依据