特异性胰岛自身抗原ZnT8的HLA限制性T细胞抗原表位研究

1型糖尿病时B细胞产生自身抗体继发于胰岛细胞损伤引起的细胞内抗原暴露，导致胰岛功能破坏的主要原因是胰岛特异性T细胞针对β细胞的特异性自身免疫攻击，寻找这种胰岛特异性T细胞所针对的靶抗原是1型糖尿病早期诊断和免疫治疗的根本。申请人美国博士后导师新近发现，在初发1型糖尿病锌转运体8(ZnT8)抗体阳性率达63%，远高于2型糖尿病的2%，且其中26%出现在传统抗原阳性(GADA, IA2-A , IAA和ICA)之前。由于ZnT8只表达在胰腺β细胞胰岛素分泌囊泡的膜上，富集锌于囊泡中，是胰岛素六聚体形成的关键因素。故申请人认为ZnT8很可能是导致胰岛破坏的特异性T细胞的靶抗原，拟在T细胞抗原表位研究工作基础上，应用SYFPEITHI等表位分析系统和ELISPOT等T细胞检测技术，寻找ZnT8的HLA-A*0201限制性T细胞抗原表位，探讨ZnT8 T细胞抗原表位多肽在1型糖尿病早期诊断中的价值。

1 型糖尿病时B 细胞产生自身抗体继发于胰岛细胞损伤引起的细胞内抗原暴露，导致胰岛功能破坏的主要原因是胰岛特异性T 细胞针对β细胞的特异性自身免疫攻击，寻找这种胰岛特异性T 细胞所针对的靶抗原是1 型糖尿病早期诊断和免疫治疗的根本。在初发1 型糖尿病锌转运体8(ZnT8)抗体阳性率达63%，远高于2 型糖尿病的2%，且其中26%出现在传统抗原阳性(GADA, IA2-A , IAA 和ICA)之前。由于ZnT8 只表达在胰腺β细胞胰岛素分泌囊泡的膜上，富集锌于囊泡中，是胰岛素六聚体形成的关键因素。认为ZnT8 很可能是导致胰岛破坏的特异性T 细胞的靶抗原，我们在T 细胞抗原表位研究工作基础上，应用SYFPEITHI 等表位分析系统预测了20个HLA-A0201的ZnT8多肽表位通过T2细胞株进行结合力与解离率筛选，筛选出一批结合力高解离率低可能在1型糖尿病中发挥作用的阳性表位，并用ZnT8质粒免疫HLA-A0201转基因鼠，ELISPOT 分析其在转基因鼠上是否存在阳性，之后通过基因型分析筛选出一批存在HLA-A0201的病人及正常对照，应用ELISPOT技术验证其是否为真正人的阳性表位。通过寻找我们鉴定了ZnT8107-115, ZnT8107-116,和ZnT8115-123 这三个ZnT8 的HLA-A*0201 限制性T 细胞抗原表位。筛选ZnT8 T 细胞抗原表位多肽,在1型糖尿病早期诊断中有重要价值，并为今后多肽免疫治疗打下基础。