IGF2BP3参与调控H/RS细胞CD99-miR9-TGFβ1/Smads-PRDM1分化轴的分子机制

Our team in former research found that IGF2BP3（IMP3） is considered to be an important marker protein or functional protein of H/RS cells in Hodgkin lymphoma(HL) and is bound up with CD99-miR9-TGFβ1/Smads-PRDM1 axis which we proposed when H/RS cells were induced differentiation toward terminal B cells. To identify the function of IMP3 in this differentiation axis, quantitative real-time PCR, FISH, Bioinformatics, flow cytometry, immunohistochemical staining, immunofluorescence, co-immunoprecipitation, GST pull down, gene transfection and interference, observation in vivo and in vitro will be used to control expression of IMP3 in HL subcell lines, and examin changes of regulatory factors in this axis and some differentiation genes toward B cells, to explore the relationship and mechanism of IMP3 in the differentiation axis. If success, a new theory about the development and differentiation or transformation of HL, a new diagnostic and therapeutic target will be set.

本课题组前期研究发现IGF2BP3（IMP3）极有可能是霍奇金淋巴瘤（HL）H/RS细胞重要标记蛋白/功能蛋白，与本课题组在诱导H/RS细胞向末端B细胞分化过程中提出CD99-miR9-TGFβ1/Smads-PRDM1分化调控轴有密切关系。在以往研究基础上，本项目采用荧光定量、流式分选、免疫组化、荧光共聚焦、免疫共沉淀、基因转染和干扰、生物信息学等技术，构建稳定抑制和过表达IMP3的HL细胞亚系,调控IMP3表达，观测分化轴各调控分子的变化、末端B细胞分化基因及蛋白的改变；从形态和功能、表观和遗传，明确IMP3在诱导分化轴作用部位、与调控者关系；如获资助，将为HL发生与发展，H/RS细胞分化与转化的分子机制提供新理论、诊断提供新靶标,诱导分化治疗提供新靶点。

霍奇金淋巴瘤(Hodgkinlymphoma, HL）是一种具有特殊临床和病理特征的B细胞淋巴瘤，临床病理主要分为两型: 结节性淋巴细胞为主型(nodular lymphocytepredominant Hodgkinlymphoma，NLPHL) 和经典型霍奇金淋巴瘤(classic Hodgkin lymphoma, cHL)。HL组织学病理特征是少数的肿瘤性巨细胞—Hodgkin细胞和Reed-Sternberg细胞（HRS细胞）平均仅占1%，而瘤细胞周围存在大量反应性细胞(淋巴细胞，组织细胞，浆细胞，嗜酸性粒细胞)。研究证实HRS细胞来源于“生发中心的残疾B细胞”，是生发中心B细胞在分化为浆细胞或记忆B 细胞成熟过程中发生分化异常或分化阻滞的结果。为此，HRS细胞的来源及诱导HRS细胞向末端B细胞分化机制一直倍受本课题组关注。本课题组前期研究发现IGF2BP3（IMP3）极有可能是霍奇金淋巴瘤（HL）H/RS细胞重要标记蛋白/功能蛋白，与本课题组在诱导H/RS细胞向末端B细胞分化过程中提出CD99-miR9-TGFβ1/Smads-PRDM1分化调控轴有密切关系。为此，在以往研究基础上，本项目采用荧光定量、流式分选、免疫组化、荧光共聚焦、免疫共沉淀、基因转染和干扰、生物信息学等技术，构建稳定抑制和过表达IMP3的HL细胞亚系,调控IMP3表达，观测分化轴各调控分子的变化、末端B细胞分化基因及蛋白的改变；从形态和功能、表观和遗传，明确IMP3在诱导分化轴作用部位、与调控者关系，为HL发生与发展，H/RS细胞分化与转化的分子机制提供新理论、诊断提供新靶标,诱导分化治疗提供新靶点。本项研究中：本课题组发现IGF2BP3是霍奇金淋巴瘤肿瘤细胞-HRS细胞一个新的标记蛋白，下调IGF2BP3基因可以抑制HRS细胞的体外生长、增殖及局部浸润能力，IGF2BP3对于霍奇金淋巴瘤而言很可能是个促瘤基因，下调IGF2BP3可通过参与调控miR9-TGF-βR1/smads轴诱导HRS细胞再分化。本研究为霍奇金淋巴瘤诱导分化治疗提供了新的理论依据与实验数据。