CD99+/mCD99L2-调控B淋巴瘤细胞与H/RS细胞转化靶蛋白及信号通路

鉴于霍奇金淋巴瘤（HL）的肿瘤细胞－H/RS细胞形态与生存环境存在特殊性，本课题组前期利用转染/干扰人源性HL细胞株L428和鼠源性B淋巴瘤细胞株A20，验证了人/鼠的B淋巴瘤细胞与H/RS细胞之间的转化同CD99+/mCD99L2-密切相关。在此基础上，本项目采用荧光差异凝胶双向电泳和质谱分析技术筛选细胞转化前后的差异蛋白，酵母双杂交技术筛选与CD99相互作用蛋白，通过蛋白质相互作用实验验证CD99作用靶蛋白，结合生物信息学分析，初步确立CD99、mCD99L2在H/RS细胞形成转化中的信号转导通路，进而利用免疫共沉淀、免疫印记、共聚焦显微镜等技术验证该通路的作用；而后检测CD99相互作用蛋白在B淋巴瘤及HL临床病理标本的表达，探究其临床意义。本研究为系列研究的深入与拓展，不仅有助于从分子水平揭示HL发生相关基因的功能，而且可为淋巴瘤分子靶向治疗提供新的靶点。

鉴于霍奇金淋巴瘤（HL）的肿瘤细胞－H/RS 细胞形态特殊性，本课题组前期利用转染/干扰人源性 HL 细胞株 L428 和鼠源性 B 淋巴瘤细胞株 A20，验证人/鼠的 B 淋巴瘤细胞与 H/RS细胞之间的转化同 CD99+/mCD99L2-密切相关。本项目采用荧光差异凝胶双向电泳和质谱分析技术筛选细胞转染前后的差异蛋白，生物信息学预测其在 H/RS 细胞转化中的信号转导通路，而后检测其在 B 淋巴瘤及 HL 临床病理标本的表达，探究其临床意义。研究发现差异蛋白septin2和stathmin参与调节H/RS细胞向末端B细胞转化，miR-9调节H/RS细胞向末端B细胞再分化，NF-KB 信号通路、CD99-C-MYC-miR-9-TGF-β-Smads通路调控B淋巴瘤细胞与H/RS细胞转化；同时还发现IMP3是H/RS瘤细胞重要的标记蛋白，其家族在HL发生、发展的作用机制，与CD99-C-MYC-miR-9-TGF-β-Smads通路的关系及其临床意义，有待后续研究。本研究不仅从分子水平揭示 HL 发生相关基因的功能，而且为淋巴瘤分子靶向治疗提供新的靶点。