人博卡病毒的非编码RNA抑制NF-κB信号通路的机制

Human Boca virus (HBoV) is a parvovirus associated with human disease that is widely prevalent in the world after the B19 virus. HBoV1 infection has been shown to be closely associated with infant respiratory syndrome, but so far little is known about its pathogenesis. In the previous experiments, we found that HBoV1 produced a non-coding RNA during replication and found that the RNA could inhibit the activation of NF-κB. We speculate that human Bocca virus may use its encoded non-coding RNA to inhibit NF-κB signaling pathway, and ultimately suppress innate antiviral immune respones. To this end, we will use HBoV1 infectious clones to construct non-coding RNA-deficient human Boca virus, and compared their effects on viral replication and innate immune response. Additionally, we will identify the cellular target of the non-coding RNA. Moreve, together with the finding that specific events in NF-κB activation targeted by the HBOV non-coding RNA, we will ultimately establish a specific pattern of HBoV1 non-coding RNA regulation of NF-κB signaling pathway. The successful implementation of this project will elucidate the molecular mechanism of HBoV1 ncRNA inhibition of innate immunity, and finally reveal a new mechanism of ncRNA regulation of innate immunity, and provide theoretical data to analyze the pathogenesis of HBoV1 .

人博卡病毒（HBoV）是继B19病毒之后在全球广泛流行的与人类疾病有关的细小病毒。现已证明HBoV1感染与婴幼儿呼吸道综合征有密切联系, 但迄今对其致病机理知之甚少。前期实验中我们发现HBoV1复制中产生一种非编码RNA（ncRNA），且发现该RNA可以抑制NF-κB的活化。我们推测HBoV1可能利用其编码的ncRNA来抑制NF-κ B信号通路，最终实现其对宿主天然免疫抗病毒反应的抑制。为此，我们将利用HBoV1的感染性克隆构建缺失ncRNA编码区的病毒，转染后比较ncRNA对病毒复制和天然免疫反应的影响，同时我们将通过确认ncRNA细胞内的作用靶点，以及其影响NF-κB 活化的具体事件，最终建立HBoV1 ncRNA调控NF-κB信号通路的具体模式。本项目将阐明HBoV1 ncRNA抑制天然免疫的分子机制，最终揭示病毒ncRNA调节天然免疫新机制，为解析HBoV1的致病机理提供理论数据。

人博卡病毒（HBoV）是继B19病毒之后在全球广泛流行的与人类疾病有关的细小病毒。现 已证明HBoV1感染与婴幼儿呼吸道综合征有密切联系, 但迄今对其致病机理知之甚少。前期实验中我们发现HBoV1复制中产生一种非编码RNA（HBoV ncRNA），且发现该RNA可以抑制NF-κB的活化。我们推测HBoV1可能利用其编码的ncRNA来抑制NF-κB信号通路，最终实现其对宿主天然免疫抗病毒反应的抑制。本项目实施以来，取得了一系列研究成果，我们证实了人博卡病毒ncRNA（HBoV ncRNA）具有抑制NF-κB 活化的作用，初步鉴定了HBoV ncRNA调控NF-κB的可能靶点，发现并筛选了与HBoV ncRNA相互作用的宿主蛋白，并在此基础上发现了宿主蛋白CUL1与HBoV ncRNA相互作用，并且CUL1可以有效抑制NF-κB的活化且其靶点可能是p65的磷酸化。另外本项目中还建立了一套完整的病毒转录组的分析技术平台，已经可以对病毒感染过程中病毒RNA的可变剪切形式进行分析。本项目执行过程中有两位博士后完成研究任务顺利出站，一名博士研究生和一名硕士研究生顺利获得学位。本项目发现了首次发现博卡病毒等细小病毒科病毒编码的非编码RNA HBoV ncRNA具有调节NF-κB活性的功能，同时进一步筛选到了数个与HBoV ncRNA相互作用的宿主蛋白，并发现了宿主蛋白CUL１结合HBoV ncRNA调控NF-κB的机制。为深入理解博卡病毒感染复制和免疫调控机制提供了理论支持。