LTF抑制鼻咽癌侵袭转移的分子机制研究

LTF是我室在染色体3p21区域发现的鼻咽癌候选易感/抑癌基因，它编码的乳铁蛋白是一种分泌性蛋白，广泛存在于乳汁、气管和鼻腔分泌物中，广谱抗微生物。我们的前期研究显示：LTF是鼻咽癌组织中下调最明显的基因，能抑制鼻咽癌增殖和侵袭转移，与临床预后密切相关，并下调PDK1/AKT信号通路，受miR214直接调控。本项目拟利用多种鼻咽癌细胞系和可视化动物模型证实LTF确能抑制鼻咽癌侵袭转移；构建LTF-shRNA慢病毒系统及AKT持续激活细胞系，结合免疫沉淀-质谱鉴定技术，再用本室已建立的LTF条件性基因剔除鼠，研究LTF对AKT通路的影响和牵涉到的具体的靶蛋白，明确LTF是否通过AKT通路来影响鼻咽癌细胞侵袭转移行为。探究miR214负调控LTF是否是LTF在鼻咽癌中下调的机制，是否也影响鼻咽癌细胞的侵袭转移。本项目的实施对于揭示鼻咽癌侵袭转移机制以及LTF应用于肿瘤防治具有重要意义。

LFT是重要的天然免疫分子，最近发现它还具有抗癌和抗肿瘤转移的作用。我们前期发现LTF在鼻咽癌组织中下调非常显著，与鼻咽癌的预后密切相关，但是其具体的分子机制并未阐明。本项目的研究目标是：1. 进一步确证LTF具有抑制鼻咽癌侵袭转移的作用；2. 通过研究LTF在PDK1/AKT信号通路中的作用，从而阐明LTF抑制鼻咽癌侵袭转移的分子机制；明确miR214通过抑制LTF表达，进而参与调控鼻咽癌侵袭转移过程。在本项目执行过程中，我们实现了上述研究目标。我们发现LTF可抑制鼻咽癌细胞的生长和侵袭能力，LTF在鼻咽癌细胞中具有抑癌基因的功能。这一功能与LTF对于AKT活性的抑制密切相关，临床样本中LTF的表达水平和AKT磷酸化水平呈负相关。LTF通过抑制MAPK通路而影响了转录因子c-JUN表达，进而影响PDK1表达，PDK1的下调导致其靶基因AKT的活性下调。我们首次发现LTF可与K18结合，这一结合导致了K18与14-3-3分子的结合受到干扰，K18-14-3-3复合体的存在可促进AKT活性，因此，LTF通过竞争性结合K18而抑制AKT活性。此外，我们首次鉴定鼻咽癌细胞中，miR-214可抑制LTF的表达水平，发挥癌基因的功能。本项目最重要的发现是确定了LTF是鼻咽癌的抑癌基因，通过对AKT通路的抑制而发挥作用。相关论文发表在Oncogene、J Cell Science、Tumour Biology等期刊上。项目主持人入选了教育部“新世纪优秀人才支持计划”，项目组第二成员的研究论文获得“湖南省第14届自然科学一等优秀学术论文”。毕业了1名博士和1名硕士。发表SCI论文3篇。