癌基因SPHK1促进胃癌生长的分子机制及功能研究

鞘胺醇激酶1(SPHK1)参与多种人类肿瘤的发生和进展，其作用的分子机制尚待阐明。我们前期研究证明SPHK1在胃癌细胞及胃癌组织中表达显著增高，与胃癌病理分级、分期及患者预后密切相关；我们进一步发现高表达SPHK1可上调Cyclin D1，c-Myc表达，促进胃癌细胞生长，并明显诱导β-catenin细胞浆/核转位。本课题将以SPHK1高表达及SPHK1 RNAi肿瘤细胞为模型，通过免疫共沉淀、免疫荧光染色，荧光素酶双报告基因等方法，探讨SPHK1激活Wnt/β-catenin信号通路的分子机制，SPHK1上调β-catenin、促进其核转位导致下游基因表达从而促进胃癌细胞增殖的可能途径；在体内体外模型中验证SPHK1对肿瘤生长的影响，分析SPHK1与多个相关基因在胃癌组织中表达的意义，最终为揭示SPHK1的生物学功能及其在胃癌发生发展中的作用机制提供科学依据，为胃癌治疗提供新的分子靶点。

鞘胺醇激酶 1(SPHK1)参与多种人类肿瘤的发生和进展，其作用的分子机制尚待阐明。研究以SPHK1 高表达及SPHK1 RNAi 稳定表达的肿瘤细胞为模型，探讨SPHK1促进胃癌细胞增殖的可能途径及信号通路的分子机制。结果如下:SPHK1-RNAi稳定表达的胃癌细胞中SPHK1表达显著下调，SPHK1-RNAi胃癌细胞增殖能力较对照组显著减弱。SPHK1-RNAi胃癌细胞的磷酸化AKT及磷酸化Rb蛋白表达明显降低，而P21、P27的蛋白表达水平明显上调。本研究还发现，SPHK1上调与miR-124表达呈负相关。SPHK1是miR-124的靶基因,miR-124直接与SPHK1的3’-UTR结合下调其表达。体内外实验证明，与RNA干扰敲除SPHK1基因结果相似, 上调miR-124抑制胃癌细胞增殖和裸鼠皮下肿瘤形成。进一步机制探讨表明，miR-124激活FOXO1转录因子,抑制AKT信号通路,上调细胞周期蛋白抑制分子P21、P27。本研究为揭示SPHK1 的生物学功能及其在胃癌发生发展中的作用机制提供了科学依据，为胃癌治疗提供新的分子靶点。