TGF-β1/Smad3介导人脐血源基质细胞调控Treg细胞Foxp3表达的研究

Foxp3阳性调节性T细胞（Treg细胞）具有诱导移植免疫耐受作用。TGF-β1/Smad3信号通路在Treg细胞Foxp3表达调控中起关键作用。我们发现，人脐血源基质细胞（hUCBDSCs）可诱导Foxp3+Treg细胞增加，并有分泌TGF-β1功能，是否hUCBDSCs通过TGF-β1/Smad3调控Treg细胞Foxp3表达尚不清楚。本项目拟体外采用hUCBDSCs与Treg细胞共培养，检测信号通路相关因子及Foxp3表达；采用分子克隆和RNAi技术探讨hUCBDSCs表达TGF-β1与Treg细胞表达Foxp3的关系；构建Smad3基因缺失异基因造血干细胞联合hUCBDSCs移植裸鼠模型，在体观察相关生物学特性。初步阐明TGF-β1/Smad3介导hUCBDSCs调控Treg细胞Foxp3表达的作用，为hUCBDSCs临床防治造血干细胞移植移植物抗宿主病提供理论和实践依据。

调节性T细胞在免疫耐受中具有重要的作用，而表观遗传学在维持调节性T细胞中均有重要的作用。我们的前期研究发现，人脐血源基质细胞具有增加调节性T细胞数量和减轻异基因造血干细胞移植小鼠GVHD的作用。本研究进一步研究发现，人脐血源基质细胞通过TGF-β1/Smad3信号通路调节CD4+CD25-及CD4+CD25+细胞FOXP3的表达并促进其组蛋白乙酰化和抑制CpG岛甲基化的作用；增强或抑制人脐血源基质细胞TGF-β1的表达，CD4+CD25-及CD4+CD25+细胞FOXP3的表达、组蛋白乙酰化和CpG岛甲基化发生相应的变化。在体实验进一步研究证实，人脐血源基质细胞具有抑制GVHD模型小鼠GVHD和延长小鼠的生存期的作用；下调人脐血源基质细胞TGF-β1表达，其抑制GVHD作用明显减弱和小鼠的生存期明显下降；其作用机制主要通过调节FOXP3的表达和组蛋白的乙酰化；输注的人脐血源基质细胞迁移到骨髓和GVHD的靶器官肝脏中。