枸杞多糖对雷公藤多苷致生殖损伤幼鼠生精功能基因表达的影响

过敏性紫癜性肾炎（Henoch-Schonlein purpura nephritis，HSPN）是导致小儿肾功能慢性衰竭的主要原因之一。雷公藤多苷（GTW）是近年来治疗血尿伴蛋白尿型HSPN的主要药物之一，疗效肯定，但可致生殖损伤。研究显示，补肾中药枸杞可以防治雄性生殖损伤。本研究拟以实验性紫癜肾模型幼鼠为研究对象，应用病理、电镜、免疫组化、基因芯片技术手段，通过观测组织病理改变、生精细胞凋亡及睾丸生精功能相关基因Herc4,Ipo11 和 Mrto4的表达来研究GTW对性成熟期前的雄性生殖有何损伤；同时根据中医"治未病"理论，结合宁夏道地药材- - 中宁枸杞的研究结果，对其在模型幼鼠应用GTW后的精子发生相关基因表达方面有何影响进行研究，旨在从细胞基因水平上探索GTW损伤性成熟期前雄性生殖功能的作用靶点和宁夏中宁枸杞防治该损伤的作用途径，并为中医"治未病"理论充实现代医学的实验依据。

【摘要】 过敏性紫癜性肾炎是导致小儿慢性肾功能衰竭的主要原因之一。雷公藤多苷是治疗血尿伴蛋白尿型紫癜肾的主要药物之一。在雷公藤多苷的副作用中，生殖损伤是影响其临床应用的重要原因，探索其损伤机制和减毒增效手段对临床具有重要的现实意义。研究雷公藤多苷导致生殖损伤的机制是本课题的主要目标，研究宁夏道地药材——枸杞是否能够促进雷公藤多苷的生殖损伤修复是本课题的另一主要目标。基于上述两个研究目标，本研究以SD雄性大鼠为研究对象，分别从紫癜肾动物模型复制、雷公藤多苷对雄性幼鼠生育力的影响、雷公藤多苷对生精细胞凋亡及其凋亡基因表达的影响、雷公藤多苷对生精相关基因表达的影响几个角度展开研究，同期对枸杞多糖是否能促进该损伤修复进行了研究，旨在探讨雷公藤多苷生殖损伤的机制和寻求能够减毒增效的途径或手段，从而服务于临床。研究中采用了组织病理、免疫组织化学、电镜、细胞培养、RT-PCR、蛋白印迹、图像分析等实验技术手段，从雷公藤多苷对体内生殖功能的影响到对体外培养的生精细胞的生长、分化有何作用均展开了研究。根据本研究结果我们得出结论：1紫癜肾模型可以成功复制；紫癜肾动物没有表现出明显的生殖损伤改变；2雷公藤多苷可以损伤雄性幼鼠的生育力，这种损伤与剂量有着密切的关系；3雷公藤多苷可以提高大鼠睾丸组织的bax/bcl-2比值，促进P53过度表达和iNOS表达；推测促进生精细胞过度凋亡是其损伤生殖功能的重要作用机制之一；4雷公藤多苷可以下调生精相关基因Herc4、Ipo11和Mrto4的表达，但差异没有统计学意义；推测和样本例数少有关；应该进行重复实验，继续研究。5枸杞多糖促进雷公藤多苷所致生殖损伤修复的机理主要表现在抑制凋亡，但是没有显示能促进精子发生相关基因表达作用。根据临床实际需要，本研究还对不同产源的雷公藤多苷的生殖损伤作用进行了比较，结果显示来源于不同厂家的雷公藤多苷在生殖损伤方面的确存在差异性。但是对于这种差异性产生的原因研究我们并未涉及。推测可能和制作工艺及药物在体内的代谢有关。希望今后能就此开展进一步研究。