细胞色素P450基因多态性与雷公藤多苷生殖损伤作用的相关性研究

Henoch-Schonlein purpura nephritis（HSPN）is a common secondary Renal glomerulus diseases in pediatrics and is also one of the important reasons that lead to children with chronic renal failure. Glycosides of Tripterygium wilfordii(GTW) is a main Chinese medicine for the treatment of this disease, it has great curative effect, but the side effects is a hidden trouble for it's widely application in clinic which has individual differences. Cytochrome P450 (CYP450) enzyme system is one of the main metabolizing enzymes in the liver, it has genetic polymorphism in the population distribution and there are important influence for the treatment、adverse reactions and the side effects in the different individuals. Studies have shown that CYP450 is of great significance to achieve individual administration in clinic. This study will analyze the CYP450、ACE and HLA-B35 gene polymorphism of nation Hui and Han children allergic purpura(HSP) and purpura nephritis(HSPN) in Ningxia by polymerase chain reaction - restriction fragment length polymorphism analysis method, to discuss the role of individual differences of CYP450 in the GTW treatment of HSP and HSPN, aims to explore the mechanism of GTW side effects differences, thus to provide a scientific basis for optimizing treatment programs and applying GTW more scientifically 、reasonably and safely in clinic.

过敏性紫癜性肾炎（HSPN）导致小儿慢性肾衰的重要原因之一。雷公藤多苷（GTW）是治疗该病的重要中成药，疗效肯定，但因可能引起生殖功能损伤而受到制约。细胞色素P450酶系是肝脏中的主要代谢酶，对人体的药物治疗、不良反应、药物毒性均有重要影响。有研究表明CYP3A4有助于降低雷公藤甲素的肝肾毒性。因此本研究提出假说——CYP450基因多态性及酶活性可能是影响GTW生殖损伤作用的重要环节。我们以HSP\HSPN患儿为研究对象，应用基因测序和芯片技术对宁夏地区回、汉族儿童MHC\HLA、ACE、CYP450基因多态性进行检测，旨在探讨本地区回汉儿童HSPN与MHC\HLA、ACE、CYP450基因多态性之间的相关性，希望能找到评价HSP\HSPN的预后和疗效的客观指标；同时对回汉儿童在遗传结构上的差异进行研究，从而为本地区HSPN患儿个体化应用雷公藤多苷治疗HSP\HSPN提供客观的参考依据。

过敏性紫癜性肾炎（HSPN）是儿童继发性肾损害，是导致慢性肾炎发生及慢性肾衰的重要原因之一。雷公藤多苷（GTW）是治疗该病的重要中成药，具有经过临床验证过的肯定疗效——曾经是儿童紫癜性肾炎的治疗指南的推荐用药，具有良好的降尿蛋白和促进血管炎恢复功效；但近年来的临床应用因受到副作用影响特别是可能引起生殖功能损伤而受到严重制约。同时，经临床实践也观察到，该药的副作用具有明显的个体差异性。细胞色素P450酶系是肝脏中的主要代谢酶，对人体的药物治疗、不良反应、药物毒性均有重要影响。有研究表明CYP3A4有助于降低雷公藤甲素的肝肾毒性。因此本研究提出假说——CYP450基因多态性及酶活性可能是影响GTW生殖损伤作用呈现个体差异性的重要影响因素。为验证基因多态性在儿童紫癜及紫癜肾的发病及转归中的影响及其与雷公藤多苷副作用尤其是生殖损伤作用的关系，本研究以儿童的静脉血样为研究载体，应用基因测序和芯片技术对宁夏地区回、汉族儿童的MHC\HLA、ACE基因多态性进行了检测，发现的确存在易感基因和保护基因的表达；同期还研究了中医证型、体质学说与基因多态性之间的关系，探讨了宁夏地区儿童HSP及HSPN与MHC\HLA、ACE、CYP450基因多态性之间的相关性及雷公藤多苷副作用呈现个体差异性的相关因素。希望能通过科学严谨的实验设计方案得到客观的实验结果，进而找到评价HSP\HSPN的转归、预后和雷公藤多多苷疗效的客观评价指标，为本地区儿童HSP\HSPN的治疗用药提供参考依据。在为期4年的课题进行过程中，课题组遇到最大的困难是由于临床治疗指南的修改以及药物说明书的修改导致研究药物在临床实际应用量的锐减，进行性地增加了研究病例样本收集的困难程度。课题组克服困难，坚持完成临床病例收集，同时增加了部分动物实验内容和细胞实验内容，以求分别从在体和离体两个维度进行相互印证。基本上完成了课题设计的研究内容。于今年申请结题。