基于“营卫气化”探讨疏肝健脾方对乳腺癌代谢与微环境稳态失衡的影响

Ying-wei gasification including mutual transformation of Ying-wei, energy metabolism, homeostasis within the body. Ying-wei gasification steady collaboration with the metabolism and microenvironment is the same. Soothing the liver and invigorating the spleen to reconcile Ying-wei, Dan Zhi Xiao Yao powder regulates metabolism and microenvironment in breast cancer metabolic reprogramming to reverse the progress of breast cancer. Dan Zhi Xiao Yao powder intervenes MDA-MB-231 breast cancer cells in nude mice, using small animal ultrasound and imaging system dynamic monitoring the process of tumor in vivo, spots location of the tumor and abdominal scans in nude mice microcirculation, metabolomic analysis of metabolic changes in the blood of breast cancer information, using Immunohistochemistry, ELISA, and Western blot to observe tumor and bone marrow organization sugar yeast solutions key enzyme, hypoxia mark, and cell outside matrix changes. Cancer-associated fibroblasts, bone marrow mesenchymal stem cells, and MDA-MB-231 breast cancer cells co-culture, discussion Dan Zhi on homeostasis of metabolism and microenvironment collaboration effect breast cancer cell growth and progress, its role mechanism whether secretion MIF protein and the MIF/CXCR4, and PI3K/AKT signal transduction pathway.

营卫气化包括营卫离合交感、营卫相互转化，包含能量代谢过程，构成人体内环境稳态。营卫气化与代谢和微环境协作稳态是相通的，疏肝健脾以调和营卫，代表方丹栀逍遥散通过调节代谢与微环境之间的串扰干扰乳腺癌代谢重编程以逆转乳腺癌因营卫气化紊乱所致的进展。用丹栀逍遥散干预MDA-MB-231乳腺癌细胞裸鼠移植瘤，采用小动物超声和活体成像系统动态监测移植瘤发生发展过程，散斑扫描裸鼠瘤体及腹部微循环，代谢组学分析乳腺癌血液代谢物变化信息，运用免疫组化、ELISA、免疫印迹等技术观察肿瘤与骨髓组织糖酵解关键酶、缺氧标记、细胞外基质变化，探讨丹栀逍遥散对代谢和微环境协作稳态的影响；体外肿瘤相关成纤维细胞、骨髓间充质干细胞分别与乳腺癌细胞共培养，探讨丹栀逍遥散是否通过干预肿瘤、骨髓微环境影响乳腺癌细胞生长、进展，其作用机制是否与其旁分泌MIF蛋白及MIF/CXCR4、PI3K/AKT信号转导通路有关。

基于中医营卫气化理论，研究疏肝健脾代表方丹栀逍遥散对乳腺癌细胞代谢和微环境的影响，对抑制乳腺癌转移和提高乳腺癌患者带瘤生存具有重要意义。.人乳腺癌MDA-MB-231细胞能量代谢活跃， GLUT1和LDHA高表达，为乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭提供葡萄糖，促进乳腺癌发生发展。丹栀逍遥散能够抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞裸鼠移植瘤的生长，下调裸鼠肿瘤组织糖酵解相关GLUT1、PKM2、MCT-1和LDHA的表达。乳腺癌细胞HIF-1α表达上调，丹栀逍遥散能够显著抑制裸鼠血浆中LDHA和HIF-1α的含量。丹栀逍遥散可能通过下调HIF-1α调控糖酵解途径，阻断乳腺癌细胞生长所需要的能量来源，影响乳腺癌的进展。.乳腺癌微环境中相关细胞与人乳腺癌MDA-MB-231细胞相互作用，在乳腺癌发生、发展、转移中起重要作用。丹栀逍遥散能够抑制裸鼠肿瘤组织中HIF-1α、MCT4、MIF、TAZ、CD47、CXCR4、IL-6、IL-8、VEGFR-2、VEGF-A、Collagen Ⅰ、Collagen Ⅳ、MMP11、LOX蛋白表达，促进Cav-1蛋白表达。肿瘤相关成纤维细胞（CAFs）是乳腺癌微环境中关键组成部分。丹栀逍遥散含药血清可能通过调控CAFs，抑制MDA-MB-231细胞增殖、侵袭、黏附能力，促进MDA-MB-231细胞凋亡，使MDA-MB-231细胞阻滞在G1期。丹栀逍遥散含药血清下调HIF-1α、MCT1、MCT4、CD47、MIF、CXCR4、IL-6、IL-8、collagenⅠ蛋白表达，上调Caveolin-1蛋白表达，提示丹栀逍遥散含药血清通过调控CAF，抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的生长和转移，可能与其调控低氧环境下乳酸代谢异常、炎症因子改变、细胞外基质、上皮间质转化失衡有关。.骨髓间充质干细胞与乳腺癌微环境密切相关,影响乳腺癌的发生发展。丹栀逍遥散能够抑制裸鼠骨髓组织中CXCR4、VEGF-A蛋白表达。HMS与MDA-MB-231细胞共培养后，能够增强MDA-MB-231细胞的增殖、迁移和侵袭能力，能够上调OCN、collagen I、MIF、CD47、CXCR4、IL-6、IL-8蛋白表达。丹栀逍遥散含药血清能够抑制该增强作用。丹栀逍遥散干预PI3K/AKT信号通路相关蛋白p PI3K和p AKT的表达。丹栀逍遥散可能通过PI3K/AKT信