针灸治疗大鼠CD肠纤维化Smads与ERK-1/2MAPK信号通路Cross talk研究

肠纤维化是长期肠道慢性炎症的结果，结缔组织生长因子（CTGF）是近年来新发现的关键致纤维化因子,研究显示：Smads和ERK-1/2 MAPK信号通路的交叉对话（Cross talk）是CTGF致纤维化的重要分子机理。本项研究在以往研究的基础上，应用天枢、气海治疗大鼠克罗恩病肠纤维化，通过动物实验研究，探索Smads和ERK-1/2MAPK信号通路间Cross talk在克罗恩病肠纤维化大鼠发病中的作用及分子机理，深入研究针灸对大鼠克罗恩病肠纤维化结肠Smads和ERK-1/2 MAPK信号通路的调节作用，阐释针灸调节或抑制大鼠克罗恩病肠纤维化信号通路的作用途径及关键信息分子；拟证实调节或抑制CTGF是针灸抗肠纤维化的重要机制，从而更有效地防治肠纤维化，为针灸治疗克罗恩病肠纤维化效应机制的阐明提供科学实验资料及理论基础。

1、按照国际公认的Morris方法成功制备SD实验大鼠，观察针灸疗法对实验性克罗恩病大鼠CTGF/Smad信号转导通路的影响。研究发现1）电针、隔药灸可以降低CD大鼠结肠组织CTGF、Smad3蛋白的表达，上调Smad7蛋白的表达，隔药灸可减少CD大鼠CFB的CTGF、FN蛋白的表达及Smad3 mRNA表达，同时上调Smad7 mRNA表达，提示：针灸治疗CD及其肠纤维化可能是通过调节CTGF/Smad信号途径起作用。2）电针、隔药灸可以下调CD大鼠结肠异常的Ⅰ型胶原、FN蛋白的表达及血清中Ⅲ型前胶原（PCⅢ）、Ⅳ型胶原（CⅣ）和透明质酸（HA）的含量，提示：针灸可通过抑制细胞外基质（ECM）的合成和增加其降解，从而发挥治疗CD的作用； .2、观察温和灸、电针及隔药灸对CD大鼠TGF-β/Smads、ERK信号途径以及bFGF、c-fos的调控，探讨针灸对肠壁纤维化的作用机制及获效环节。结果发现1）针灸“天枢”、“气海”可以下调CD肠纤维化大鼠结肠异常增高的Ⅰ型胶原和FN蛋白的表达，发挥抗肠纤维化的作用；2）TGF-β/Smads信号通路是导致大鼠CD肠纤维化的主要途径之一，其中Smad4是该信号通路的关键环节之一；针灸可能通过对TGF-β、Smad2以及Smad4表达的调控发挥抗肠纤维化的作用；3）Ras/Raf/MEK/ERK信号通路有促肠纤维化作用，针灸可能通过抑制其在CD肠纤维化大鼠肠壁组织中的表达抑制纤维化发展，从而发挥抗肠纤维化的作用；4）bFGF参与了大鼠CD肠纤维化过程，针灸可能通过降低结肠黏膜bFGF、c-fos mRNA及蛋白表达发挥对CD肠纤维化的治疗作用。