ETS基因融合在我国前列腺癌中的特征分析与临床转化的研究

近年来，前列腺癌在我国的发病率增长迅速。目前困扰临床的两大难题是如何寻找更特异的肿瘤标志物和区分不同恶性度的前列腺癌。最近的研究发现，非随机性的ETS基因融合可能在前列腺癌的发生和演进中起重要作用。其中高频度的TMPRSS2-ERG融合最为引人关注。研究发现，TMPRSS2-ERG具有癌特异性且和预后相关，因此是潜在的新型肿瘤标志物。申请人还发现TMPRSS2-ERG融合与抑癌基因PTEN的缺失密切相关。目前，该研究领域在我国尚处于起步阶段。本课题拟采用组织微阵列，FISH和RT-PCR技术，确定ETS基因融合在我国前列腺癌人群中的发生频度并分析TMPRSS2-ERG融合变异的特征；优化TMPRSS2-ERG基因融合尿检测法，分析其在肿瘤早期诊断和预后判定方面的价值；使用FISH联合检测TMPRSS2-ERG，PTEN和C-MYC的异常，探讨为高恶性度的前列腺癌建立"分子标签"的可行性。

本研究采用荧光原位杂交技术（FISH）、免疫组织化学技术（IHC）染色质免疫共沉淀(ChIP)、组织微阵列(TMA)、SiRNA干扰、基因过表达等分子生物学技术，发现：（1）我国前列腺癌患者中，ETS基因重排主要涉及ERG、ETV1、ETV4和ETV5等转录因子。其中，以ERG基因重排最多见，其发生率为23.2%（44/190），ETV1、ETV4和ETV5的重排发生率分别为2%（3/186），1%（1/192）和0%。ERG重排发生率(23%)明显低于西方发达国家的报道频度。（2）ERG基因重排与前列腺癌特异性死亡显著相关，是判定前列腺癌预后的独立指标。在Ki-67低表达（LI <10%）前列腺癌人群中，ERG基因重排的检测有助于识别预后差的患者。（3）ERG基因重排和多种重要致病基因的异常密切相关，如PTEN基因缺失，SOX4基因的过表达等。（4）SOX4是一重要致癌基因，可通过参与上皮间质转化(EMT)，促进促进癌细胞的侵袭。在中国前列腺癌人群中，SOX4过表达是一不良预后因子，可作为独立的临床预后指标用于判定病人预后。（5）SOX4是ERG的靶基因。而且ERG可和SOX4在蛋白水平上相互结合，并协同促进EMT，在前列腺癌发生及进展过程中发挥重要作用。在此过程中它们接收表观遗传学的调控。临床上，联合检测前列腺癌患者ERG基因重排和SOX4表达水平，对准确预测肿瘤的预后方面有一定价值。（6）TMPRSS2-ERG具有癌特异性，可使用RT-PCR法在我国前列腺癌患者的尿液中检测TMPRSS2-ERG融合产物，特异性高(4/4, 100%)，但敏感性低 (4/26, 15.4%)。因此，它在我国前列腺癌临床早期检测中可能有一定的局限性。（7）ETS家族另一成员ETV4在体外可促进前列腺癌细胞的增殖、侵袭及EMT的发生。uPA是其靶基因，并且ETV4和uPA/uPAR之间存在相互协同作用。(8) SPINK1过表达与TMPRSS2-ERG呈互斥性存在， SPINK1可作为评价我国前列腺癌预后的另一重要指标。（5）SPINK1可促进前列腺良性增生上皮细胞及前列腺癌细胞发生EMT。该表型是由EGFR介导，并主要涉及EGFR/MAPK/MEK/ERK信号通路。CTGF为该通路下游的一个重要靶分子。上述结果以ETS基因重排研究为核心，探讨了在前列腺癌发生发展和演进过程中发挥驱