间充质干细胞对肝癌细胞及肝癌微环境的作用研究

骨髓间充质干细胞（MSCs）作为有多向分化潜能的成体干细胞，兼有免疫调节、炎症趋化、低免疫原性等特性，被广泛用于慢性肝衰治疗和移植免疫。然最近一些研究发现MSCs会促进某些肿瘤的生长和转移，因此明确MSCs同肝癌发生发展之间的关系对MSCs在肝病的安全应用非常重要。在前期工作中通过共培养技术，我们发现MSCs同肝癌细胞间存在频繁的物质交流，结合其免疫抑制特性，推测MSCs可能以直接接触和旁分泌等途径参与了肝癌和肝癌微环境的形成，促进了肝癌生长和免疫逃逸。为验证这一假说，本研究拟通过体外MSCs和肝癌细胞共培养来观察MSCs对肝癌细胞和免疫细胞生物特性的影响；通过裸鼠皮下或尾静脉注射MSCs和肝癌细胞来观察MSCs对肝癌成瘤能力及转移能力的影响，并对其可能作用机制做初步探讨。本研究不仅有助于我们更好地了解肝癌的发生发展，还为研制以MSCs为靶标的肿瘤分子分期和MSCs的安全应用提供理论借鉴。

间充质干细胞（MSCs）有免疫抑制、炎症趋化以及低免疫源性等特性。肿瘤相关成纤维细胞（CAFs）被认为是由MSCs分化而来，是肿瘤微环境中肿瘤基质的重要组份。近年有研究表明MSCs和CAFs有促进肿瘤转移的潜能，但其具体机制尚不清楚。本研究我们通过MSCs和CAFs分别与免疫细胞、肝癌细胞共培养的模型，研究其对免疫细胞以及对肿瘤细胞的调节作用。. 我们发现，MSCs不仅能抑制淋巴细胞增殖而且可以上调具有免疫调节作用的Treg细胞比例，其中PGE2和IDO可能在MSCs上调Treg细胞过程中发挥一定作用。通过MSCs与树突状细胞（DC）的共培养模型，我们发现MSCs可通过抑制MAPK、NF-κB通路的活化而影响DC的形态及功能；此外我们还发现MSCs使DC高表达SOCS蛋白，而沉默SOCS蛋白后，MSCs对MAPK、NF-κB通路的抑制作用有所减弱。通过MSCs与NK细胞的共培养模型发现，肿瘤组织内肿瘤相关成纤维细胞可以通过抑制NK细胞的功能使NK细胞丧失免疫监视作用，从而间接促进肿瘤细胞发生免疫逃逸。尽管很多细胞可以分泌PGE2和IDO来影响肿瘤细胞和免疫细胞的功能，但是肿瘤相关成纤维细胞能通过分泌PGE2和表达IDO来调控NK细胞的功能可能是肿瘤获得免疫逃逸的新途径。通过CAFs与肝癌细胞的共培养模型发现，CAFs在体外可促进肝癌细胞增殖和发生上皮-间质转化（EMT），在体内可促进肝癌生长并减少肿瘤的坏死；发生了EMT后的肝癌细胞具有更强的侵袭、迁移能力，并且对化疗药物的抵抗性增加；进一步的研究发现，CAFs可能是通过分泌HGF、IL-6等诱导肝癌细胞的增殖和发生EMT，从而促进肝癌的生长、侵袭和迁移。. 本研究的这些结果证实了MSCs以及CAFs在肿瘤微环境中的免疫抑制作用和促肿瘤作用。这不仅有助于我们更好的了解肝癌的发生发展和转移的机制，而且可以为研制以MSCs或CAFs为靶标的肿瘤新型防治手段提供了理论基础。