肿瘤相关成纤维细胞促肝癌细胞上皮-间质转化的分子机制研究

上皮-间质转化（EMT）是肿瘤细胞获得迁移和侵袭能力的一种重要病理生理过程。我们研究发现，肝癌来源的肿瘤相关成纤维细胞（CAFs）能诱导与之共培养的肝癌细胞发生EMT，并使肝癌细胞迁移、侵袭能力明显增强。然而在此过程中，肝癌细胞内哪些信号通路可能被激活？哪些分子的表达发生了变化？目前尚未被系统研究过。本项目拟通过同位素标记相对和绝对定量（iTRAQ）的蛋白质组学方法和miRNA芯片的研究方法，分析CAFs促肝癌细胞EMT时其miRNAs和蛋白质组的整体变化情况，从中寻找肝癌细胞EMT过程的重要调控分子或标志物；并进一步探讨这些分子在调控肝癌EMT过程中的具体机制以及临床意义。本项目不仅对了解肝癌恶性转化的病理机制具有理论意义，也对肝癌的临床诊断和分子靶标药物的开发具有参考价值。

上皮-间质转化是肿瘤细胞获得迁移和侵袭能力，并向远处转移的重要起始过程。我们前期发现：肝癌组织提取的成纤维细胞（H-CAFs）与肝癌细胞共培养可诱导其发生上皮-间质转化，但其机制不详。本研究，我们通过iTRAQ等蛋白质组学方法分析了H-CAFs的分泌因子组分、微囊泡蛋白质和miRNA等组分，以及肝癌细胞EMT所发生的蛋白质组变化，并进行了相关机制探讨。结果发现H-CAFs可分泌大量IL-6 和HGF等分子，这些分子能直接诱导出EMT和增强细胞的侵袭和迁移力，其机制可能是通过IL-6/STAT3通路激活进而诱导TG2蛋白质高表达而发生；进一步在临床标本中我们通过组织芯片分析发现TG2等蛋白质的表达异常与肿瘤的转移相关、可作为预后的独立因素。此外，本研究还发现了H-CAFs诱导DCs细胞和MDSCs细胞促进肝癌细胞免疫逃避的一些分子机制。本研究不仅对深入了解肿瘤发展和转移的分子机制有理论意义，也对寻找肝癌的临床诊断标志和分子靶标药物的开发具有参考价值。