猪瘟病毒体内与体外感染及其编码蛋白调控NF-κB信号途径的致病分子机制研究

核转录因子NF-κB是一种广泛存在于各类细胞中的重要调控因子，也是机体对病原感染反应的关键调节因子，它参与机体免疫、炎症和凋亡等多种生理、病理过程，与疾病的发生有密切关系。近年来，细胞NF-κB信号转导异常同疾病的关联是生命科学研究的热点之一，而在畜牧兽医方面NF-κB研究不多，对其与疫病的关系所知甚少。本项目根据NF-κB信号转导途径的理论及相关研究成果，在我们原有工作的基础上，针对猪瘟病毒致病机制尚不清楚这一科学问题，以猪瘟病毒体内与体外感染及其编码蛋白与宿主机体/细胞NF-κB信号途径相互作用关系为主线，选择合适相关组织细胞、蛋白分子、细胞因子等作为研究对象，从不同层次和角度进行研究，以揭示猪瘟病毒感染引起细胞蛋白功能改变及免疫调控的分子机制，进而从新的角度了解猪瘟的发病机制，为防控猪瘟提供理论依据，也为猪瘟新型疫苗设计寻找新的途径，对控制猪瘟发生的难题具有重要意义。

核转录因子NF-κB (nuclear factor-κB)是一种调控多种基因表达的重要因子，它参与免疫和炎症的发生、细胞增殖、细胞凋亡等多种生理、病理过程，与疾病的发生、发展有密切的关系。NF-κB作为机体对病原生物感染的早期反应过程中的关键调节因子，在宿主的免疫反应及炎症反应过程中发挥着极其重要的作用。本项目开展了猪瘟病毒（Classical swine fever virus, CSFV）体内与体外感染及其编码蛋白与宿主机体/细胞NF-κB信号途径相互作用的研究。首先，以PK-15细胞为模型研究CSFV对PK-15细胞NF-κB信号通路的活性影响；其次，在前期的工作基础上进一步开展了CSFV体外感染猪树突状细胞（DC） NF-κB信号途径关系分析及免疫功能影响研究；再次，构建了猪瘟病毒Erns、E2、C等蛋白真核表达载体，研究猪瘟病毒编码蛋白对PK-15细胞NF-κB信号途径活化影响；接着，以传代免疫细胞猪肺泡巨噬细胞为模型，研究了猪瘟病毒感染对猪肺泡巨噬细胞NF-κB信号途径活化的影响；最后，研究了CSFV对猪体内外周血单核细胞（PBMC）NF-κB信号途径活化影响。.　　猪瘟病毒体外感染研究发现CSFV能抑制PK15细胞和DC细胞NF-κB信号途径活化，但在感染猪肺泡巨噬细胞时能明显激活NF-κB信号途径活化。在体内感染实验中发现CSFV感染抑制了PBMC细胞NF-κB信号途径活化。在对CSFV编码蛋白的研究中发现Erns、E2蛋白能抑制TNF-a诱导的NF-κB信号途径活化，C蛋白能够促进NF-κB信号途径活化。研究表明猪瘟病毒对于NF-κB信号途径活化有着复杂、精细的调控功能，NF-κB信号途径在猪瘟病毒免疫逃逸中起着重要的作用。该研究项目共发表研究性论文12篇，其中SCI论文10篇，中文核心2篇。获得国家发明专利1项。已经培养博士研究生2名，硕士研究生1名。目前有2名博士研究生和1名硕士研究生正在从事本课题相关内容后续研究。