UCHL1在乳腺癌中的甲基化状态及其调控p53和β-catenin信号通路的研究

我们前期研究发现:由于启动子甲基化致去泛素化酶（UCHL1）在多株乳腺癌细胞株(7/11)中表达缺失;外源性表达UCHL1可抑制乳腺癌细胞生长、诱导凋亡;初步发现UCHL1可以上调p53及下游靶分子、p27、cyclinB1及凋亡相关蛋白的表达，激活β-catenin信号通路。因此认为UCHL1在乳腺癌中起着重要作用，但具体机制不清。本项目拟通过扩大样本以鉴定UCHL1与乳腺癌分级、分期的相关性，为乳腺癌的早期诊断提供靶点；期望通过构建稳定表达和稳定干扰UCHL1的人乳腺癌细胞模型，进一步研究UCHL1对乳腺癌发生发展的作用；通过小分子阻断剂阻断β-catenin和MDM2后深入探讨UCHL1与β-catenin/β-Trcp及p53/MDM2的相互作用关系，最终获得UCHL1调控乳腺癌细胞凋亡和周期的可靠证据，拟通过特异的信号分子来纠正发生错误的信号传递途径，为乳腺癌防治提供实验依据。

乳腺癌是遗传和环境相互作用所致的一种复杂疾病。最近的研究表明表观遗传调控异常的基因在肿瘤的发生发展中起着重要的作用。UCHL1在多种肿瘤中因启动子DNA甲基化而表达下调。但是其在乳腺癌中的角色尚不清楚。我们发现UCHL1在乳腺癌细胞株及组织中表达下调，但在正常乳腺组织中广泛表达。90%的乳腺癌细胞株及80%的乳腺癌组织中UCHL1启动子发生甲基化，但是在正常乳腺组织中罕见甲基化。表观遗传调控的UCHL1甲基化与乳腺癌组织临床分级及PR受体密切相关。外源性表达UCHL1可抑制乳腺癌细胞的增殖及诱导凋亡。我们进一步发现UCHL1诱导p53的堆积，同时减少MDM2蛋白表达水平，进一步上调p21,p27,Cleaved Caspase3 和cleaved PARP.因此，UCHL1 通过抑制乳腺癌细胞的周期阻滞和诱导凋亡而在乳腺癌终作为一个抑癌基因。其频繁的甲基化可以作为乳腺癌潜在的标志物。