高效抗Cyclin D1胞内抗体的定向进化及肿瘤靶向治疗研究

CyclinD1是细胞进入增殖周期合成的第一个周期蛋白，在许多肿瘤细胞中过度表达，促进肿瘤细胞增殖，是肿瘤防治的一个重要靶点。申请人研究组曾首次以CyclinD1为靶点研制了具有抗肿瘤效应的抗CyclinD1人源胞内单链抗体，但由于该抗体的亲和力较低，限制了其进入临床进程。为了提高该抗体的亲和力和稳定性，高效抑制肿瘤细胞增殖，本课题将该抗体进行定向进化，即利用核糖体展示技术结合易错PCR，获得高亲和力的抗CyclinD1单链抗体库,进而采用胞内抗体捕获技术(IACT)筛选出体内稳定、高效的抗CyclinD1人源胞内单链抗体，结合肿瘤特异性真核表达载体的使用，实现其靶向治疗。通过抗体活性表征、细胞转染、裸鼠致瘤等体内外实验研究，分析改造后的胞内抗体的作用效能及机制，为获得高亲和力、靶向、高效的胞内抗体提供新技术平台，为肿瘤靶向治疗提供理论基础和技术支持，也为这一新型胞内抗体进入临床奠定基础。