DNA双加氧酶TET3通过羟甲基化作用激活CXCR4而导致肾癌转移的作用机制

Renal cell carcinoma is the second most common malignancy of the urinary system. DNA dioxygenase TET3 has an abnormally increased expression in renal cell carcinoma, especially in metastatic tissues, and is an independent prognostic factor for renal cell carcinoma. TET3 can directly regulate the 5-hmc level in the CpG island region of the target gene, thereby regulating the gene expression. Through the in vitro experiments, we found that TET3 can promote the invasion and metastasis of kidney cancer cells. Further ChIP experiments confirmed that TET3 can bind to the promoter region of CXCR4 and TET3 can affect the expression of CXCR4. In view of CXCR4 has been confirmed by researchers to correlate with invasion ，metastasis and stem cell properties in renal cell carcinoma. We intend to explore the mechanism of TET3 regulation of CXCR4 expression, and explore whether TET3 expression lead to the invasion and metastasis of renal cell carcinoma by regulation of CXCR4 expression.

肾癌是泌尿系统发病率排名第二的恶性肿瘤。 DNA双加氧酶TET3基因在肾癌肿瘤组织中表达异常增高，尤其在转移灶组织中表达显著增高，并且是肾癌的独立预后预测因子。TET3能够通过羟甲基化直接调控基因cpG岛区域的5-hmc水平，进而调控基因的表达。通过前期实验，我们发现TET3能够促进肾癌细胞体外的侵袭转移，进一步ChIP实验证实，TET3能够结合在CXCR4的启动子区域，且TET3能够影响CXCR4的表达。鉴于CXCR4已被研究者证实与肾癌的侵袭转移和细胞干性有关。本课题拟探讨TET3调控CXCR4表达的机制，以及TET3是否通过调控CXCR4表达导致肾癌侵袭转移的疾病功能。

肾癌是泌尿生殖系统肿瘤发病率排名第二的肿瘤，根据美国癌症中心的统计数据，2014年新发肾癌约39140例，其中将近90%为肾细胞癌，大约20-30%的肾癌患者在初诊时已经存在转移灶，在接受肾脏部分切除或者根治性切除后，仍有20%-40%的患者在随访中出现肿瘤转移。本研究通过实验设计并结合临床资料：1) 通过小分子干扰技术或精准敲除技术、细胞实验及荷瘤鼠动物实验，探讨通过对TET3这一靶点进行人为干预对肾癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响。2).CXCR4启动子活性及甲基化测定，通过ChIP实验检测TET3与CXCR4启动子结合位点，对CXCR4启动子结合位点进行突变并检测CXCR4启动子活性。3).通过LPS干预内皮细胞，分析其引起血管形成相关蛋白的作用机制。4）结合本中心的患者资料，检测本中心肾癌样本中CXCR4及TET3的表达情况并分析其进行不同术式选择的预后情况。