基于临床代谢转化和MGRG3受体发现的双黄连注射液中绿原酸类成分致类过敏机制研究

The topic of whether chlorogenic acids (CAs) could cause the anaphylactoid reaction (AR) or not and its mechanisms are still controversial. Therewith, this current situation has already impeded the sustainable development of Shuanghuanglian Injection. Those problems mainly focus on: (1) the clinical metabolic transformation rules of CAs under entire Shuanghuanglian Injection substance background have not been clarified; (2) the mechanism underlying AR of Shuanghuanglian Injection is not clear. The metabolic transformation phenomenon of CAs was discovered in our previous studies, which further demonstrated that CAs could target MGRG3, a G-protein-coupled receptor on the surface of mast cell, and cause degranulation. Therefore, the project investigates the metabolic transformation rules of CAs from clinic metabolic transformation; the difference of AR caused by the metabolites of CAs will be evaluated by cellular dynamics; the biological mechanism will be clarified in cellular model (siRNA/shRNA/overexpression) and MGRG3-genetically modified mouse model. Our research attends to explore whether and how CAs cause AR in clinic and entire Shuanghuanglian Injection substance background, which provides scientific reference for the quality control and clinical rational administration of Shuanghuanglian Injection.

双黄连注射液中绿原酸类成分是否会引发类过敏反应及其作用机制至今尚无确切定论，但已给双黄连注射液可持续发展蒙上了一层阴影！问题的症结在于：（1）在双黄连注射液整体背景干预下绿原酸类成分临床代谢转化规律不清晰；（2）绿原酸类成分致类过敏机制不明确。项目组前期研究发现，绿原酸类成分代谢转化现象突出，可与肥大细胞表面G蛋白偶联受体MGRG3结合而引发脱颗粒现象。为此，本项目从临床代谢转化切入，解析双黄连注射液整体背景干预下绿原酸类成分的代谢转化规律；采用细胞动力学指纹谱技术评价绿原酸类成分引发类过敏反应的差异性；从细胞水平（siRNA敲低/外源瞬时过表达，稳定干涉/过表达细胞系）和动物水平（MGRG3转基因小鼠模型），阐释其致类过敏的生物学机制，以期回答绿原酸类成分在临床真实世界、在双黄连注射液整体背景干预下能否/如何引发类过敏等关键问题，为提升双黄连注射液质量控制与临床合理用药水平提供科学依据。

双黄连注射液中绿原酸类成分是否会引发类过敏反应及其作用机制至今尚无确切定论，但已给双黄连注射液可持续发展蒙上了一层阴影！问题的症结在于：（1）在双黄连注射液整体背景干预下绿原酸类成分临床代谢转化规律不清晰；（2）绿原酸类成分致类过敏机制不明确。项目从临床代谢转化切入，解析双黄连注射液整体背景干预下绿原酸类成分的代谢转化规律；阐释其致类过敏的生物学机制。研究发现，绿原酸在一定条件下转化为隐绿原酸和新绿原酸；相对于绿原酸类成分中其他成分，隐绿原酸、新绿原酸、咖啡酸可不同程度的引发肥大细胞脱颗粒效应。进一步研究发现，绿原酸本身可能不是导致双黄连注射液致类过敏的原因，它的体内转化产物隐绿原酸、新绿原酸具有更强的活性，可通过作用于MGRG3诱导肥大细胞脱颗粒生物学事件发生，胞内的炎性介质白三烯、组胺等释放，从而引发类过敏样症状。本项目还凝炼形成“临床生物特征谱学”学术概念，成果还拓展应用于红花注射液、疏血通注射液等中药注射剂质量波动评价，为关联临床的中药复方质量评价和临床合理用药水平研究提供科学参考。.本项目完成了《项目计划书》既定任务，达到相关考核要求。发表学术论文7篇，其中SCI论文3篇、中文卓越期刊论文3篇；专利公开1项，软件著作权1项；作为主要执笔人完成国家CDE《中药生物效应检测研究技术指导原则》；获国家药品不良反应监测中心授予的《国家药品不良反应监测哨点联盟证书》；服务于国家人社部科技扶贫项目；培养了国家百千万人才工程入选者、北京“高创计划”领军人才、中华中医药学会中青年创新人才、北京市优秀人才“青年拔尖团队”；组织国际学术交流会1次（中国北京，2018）、参加国际学术交流会议1次（日本东京，2019）；获批临床合理用药评价国际合作联合实验室、北京市临床药学研究所；相关研究工作延伸获批国家自然科学基金重点项目1项。