真武汤抗心衰与TGF-β/Smad-periostin蛋白关系实验研究

Heart failure is due to spleen and kidney′s yang deficiency, mixed with water、phlegm and blood stasis, Zhenwutang can improve heart Yang and excite pulse, cold water can be warmed，the warming spleen can eliminate the phlegm. Periostin protein play an important role in the process of the extracellular matrix ( ECM ) fibrosis and ventricular remodeling in heart failure. Ang II, TGF- β1/Smad4 can influence the formation and maturity of the myocardial cells and cardiac fibroblasts by the regulation of the matrix protein .Periostin, to affect the regulation of the ECM reconstruct and the fibrosis and ventricular remodeling. The purpose of this study is to see the relationship Zhenwutang cure the congestive heart failure using the rats congestive heart failure model between ventricular remodeling and Ang II, TGF- β/Smad -Periostin, we use the cultured myocardial cells and fibroblasts to study its molecular mechanism of Zhenwutang curing the heart failure and the fibrosis and changes in cell matrix function and its molecular mechanism induced by AngⅡ，the relationship of Periostin and the ventricular remodeling , the pathway there by study on effect of Zhenwutang between anti heart failure with, to provide the new targets and experimental basis to expand the clinical practice of Zhenwutang,to reveal the scientific connotation of warming yang for diuresis to therapy heart failure.

心衰病机主要由于心脾肾阳气虚衰、水湿痰瘀滋生互结而成，真武汤行心阳振奋而脉自充,寒水得温则自化,脾得温运则痰自消。Periostin 蛋白在心衰过程中的细胞间基质（ECM）生成、纤维化和心室重构发挥重要作用。AngⅡ、TGF-β1/Smad4 通过下游基质蛋白 periostin 调节，影响心肌细胞与心肌成纤维细胞及胶原的生成与成熟，从而对ECM重构的调节、纤维化和心室重构中发挥重要作用。本研究旨在心衰大鼠模型中研究真武汤抗心衰以及心室重构与AngⅡ、TGF-β/Smad通路-Periostin蛋白的相关性，利用培养的心肌细胞与成纤维细胞探讨真武汤拮抗AngⅡ引起的细胞纤维化以及细胞基质功能改变及其分子机制，从而研究真武汤抗心衰作用与periostin及心室重构之间的关系及其信号转导途径，为拓展真武汤的临床实际应用提供新靶点与实验依据，揭示温阳利水治疗心衰的科学内涵。

心力衰竭是指心脏心肌结构功能病变所引发的心肌收缩/舒张功能障碍，进而导致心血管系统血流动力学异常的一种急性或慢性综合征。随着高血压和冠心病发病率不断飙升，恶化为心力衰竭的患者逐年增多，心衰已成为心血管疾病中主要疾患之一。中药可明显改善心衰患者预后，可全方位调节器官功能，疗效显著。真武汤可有效治疗心衰，降低心衰患者的发病率与死亡率。.本研究采用动物实验考察真武汤抗心力衰竭作用，深入探讨真武汤抗心力衰竭作用的分子机制，通过构建细胞心衰模型揭示真武汤抗心衰TGF-β1/JNK等信号通路的相关性以及潜在的临床治疗分子靶点，以进一步理解真武汤抗心衰与心肌重构的细节机制，为防治心衰提供新靶点。.实验中，心衰组大鼠左心室湿重、LVEDP均显著增加（P＜0.05）。给药组大鼠LVEDP降低，心功能明显改善；心脏形态学指标分析显示：心衰组大鼠的全心脏湿重、左心室湿重均显著增加。给药组大鼠的左心室湿重明显降低，梗死瘢痕区重量显著缩小（P＜0.05），且具有剂量依赖性，高剂量效果接近阳性对照组；心脏形态变化：药物组梗死区明显纤维化，部分核消失，胞质呈粗颗粒状。药物组大鼠的梗死区观察到纤维化明显减轻并且LVMI、CVF等指标均降低，且心脏形态得到改善。心梗后心衰大鼠心肌periostin蛋白表达显著增加，药物组真武汤可显著抑制periostin的表达（P﹤0.05）。药物组心肌TGF-β1表达量显著减少，且剂量越大效果越显著（P﹤0.01）。.原代心肌细胞衰竭后TGF-β1表达量显著升高，而真武汤干预能够显著抑制TGF-β1的升高，且降低心衰心肌中的p-JNK表达。真武汤干预显著降低原代心肌细胞衰竭后的凋亡比例，真武汤干预组心肌细胞的periostin蛋白表达显著降低，真武汤显著降低了I型胶原mRNA合成（P﹤0.01）。.真武汤具有抗心衰作用，治疗心衰时与心室重构过程中细胞间基质相互作用有关系，真武汤治疗心衰作用涉及AngⅡ、TGF-β/Smad通路-Periostin蛋白途径，为拓展真武汤的临床实际应用提供了新靶点与实验依据，揭示了温阳利水治疗心衰的科学内涵。