炎症病理模型中稳定过表达的hGRβ功能的研究

收集重组人糖皮质激素受体hGRβ和hGRα的全长正、反义逆转录病毒，分别感染可诱导炎症病理的大鼠肾小球系膜mc53细胞和人气道上皮HBE16细胞，以G418筛选抗性单克隆细胞；另将分别针对hGRα和hGRβ羧基端的反义DNA序列克隆至pcDNA6质粒，转染并筛选灭瘟素（blasticidin）抗性单克隆细胞；在所获一系列具有不同hGRβ/hGRα相对水平的细胞中，以脂多糖或TNFα刺激炎症产生，加/不加糖皮质激素（地塞米松）处理，通过比较炎症因子如ICAM-1、IL-1的定量RT-PCR结果、广泛性炎症转录因子NFκB或AP-1的EMSA改变及受体特异性抗体的Western blot免疫印迹杂交等结果，确定这些病理模型细胞中hGRβ表达是否具有抗炎效应，从而为阐明hGRβ的功能及其与hGRα的关系提供新资料，并为明确hGRβ可否成为特定情况下替代糖皮质激素的基因治疗的靶基因提供依据。