肿瘤抗凋亡调节因子c-FLIP专一抑制剂的研究

Cancer cell resistance to death receptors-mediated programmed cell death is one of important mechanism involving in tumor anti-apoptosis. The c-FLIP family proteins (c-FLIPs) plays a key role in anti-apoptosis by competition for binding to death effector domain of FADD with procaspase-8 in death receptor-induced signaling pathway. Overexpression of c-FLIPs are mainly attributed to the most of tumor cell lines resistance to chemotherapeutic agents and death receptor-induced apoptotic effects. Downregulation of c-FLIPs by RNAi can rescue apoptosis in these tumor cells resistance to apoptosis. However, little information about molecular inhibitor or antagonists of c-FLIP have been reported. Based on the competition for binding to death effector domain (DED) of FADD by c-FLIP and procaspase-8，the present proposal is to develop a system to screening and characterizing high-affinity and selective motif and/or peptide sequence to bind c-FLIP, but procaspase-8, from FADD-DED, and to obtain c-FLIP molecular inhibitor or antagonist. The finding will provide helpful insights into combined cancer therapy by association of c-FLIP antagonist with TRAIL mimics/agonists, antagonists of IAPs and Bcl-2, and with chemotherapeutic agents.

癌细胞对死亡受体介导的凋亡耐受是肿瘤抗凋亡的重要调节机制。c-FLIP家族蛋白是死亡受体信号中重要的调节因子，通过与procaspase-8竞争结合到接头蛋白FADD上，抑制凋亡发生。在某些肿瘤细胞系中，c-FLIP的过表达是肿瘤细胞对死亡受体介导的凋亡及化疗产生耐受主要原因之一。RNA干扰c-FLIP的表达能够很大程度提高这些肿瘤细胞对凋亡的敏感性。然而，目前尚无c-FLIP专一性拮抗剂的报道。本项目基于c-FLIP与procaspase-8竞争结合到FADD死亡效应结构域（DED）为基础，通过建立体外与c-FLIP、procaspase-8相互作用的体系，对FADD-DED结构域中各功能片段进行筛选，从而找到c-FLIP专一性结合的小分子肽段。为开发c-FLIP拮抗剂与TRAIL激动剂、IAPs和Bcl-2拮抗剂的联用，以及与化疗药物联用治疗癌症提供重要的临床应用基础。

癌细胞对死亡受体介导的凋亡耐受是肿瘤抗凋亡的重要调节机制。c-FLIP 家族蛋白是死亡受体信号中重要的调节因子，通过与procaspase-8 竞争结合到接头蛋白FADD上，抑制凋亡发生。在某些肿瘤细胞系中，c-FLIP 的过表达是肿瘤细胞对死亡受体介导的凋亡及化疗产生耐受主要原因之一。RNA 干扰c-FLIP 的表达能够很大程度提高这些肿瘤细胞对凋亡的敏感性。然而，目前尚无c-FLIP 专一性拮抗剂的报道。本项目基于c-FLIP 与procaspase-8 竞争结合到FADD 死亡效应结构域（DED）为基础，通过建立体外与c-FLIP、procaspase-8 相互作用的体系，对FADD-DED 结构域中各功能片段进行筛选，从而找到了c-FLIP与procaspase-8专一性结合的小分子肽段。为开发c-FLIP 拮抗剂与TRAIL 激动剂、IAPs 和Bcl-2 拮抗剂的联用，以及与化疗药物联用治疗癌症提供重要的临床应用基础。也为开发Procaspase-8拮抗剂治疗阿兹海默症提供重要的临床应用基础。我们还明确了死亡受体通路对正常和肿瘤细胞的特异性分子机制，即正常细胞的死亡受体和procaspases 的低表达，使正常细胞对TRAIL耐受，而肿瘤细胞通过procaspases 的低表达对TRAIL耐药。这为通过死亡受体通路治疗癌症提供重要的临床应用基础。