中国西南地区汉族人群ABCB4基因单核苷酸多态性与肝胆管结石相关性的研究

Multidrug resistance 3 protein(MDR3) and ABCB4 gene as proteincoding gene have become a hot field of the pathogenesis of cholestasis and cholelithiasis. The expression of .MDR3 protein is abnormal in previous small sample study on hepatolithiasis.The relationship between MDR3 protein and hepatolithiasis has not been clearified. The ethnic and original difference is significant in hepatolithiasis,thus the genetic background is worthy of attention. Studies have suggested that MDR3 protein is involved in the transport of phospholipid across the membrance of hepatocyte,. dysfunction of MDR3 protein promote gallstone formation. Moreover, many proofs have suggested that SNPs of ABCB4 gene is asscioated with abnormal phospholipid metabolism diseases and cholelithiasis. We presume that the SNPs of ABCB4 gene may be invoved in hepatolithiasis. First, the methods of screening SNPs of ABCB4 gene and LD analysis are adopted to reveal the association between SNPs of ABCB4 gene and hepatolithiasis in large sample on hepatolithiasis.Then, by the techniques of PCR site-directed mutagenesis and substrate labeling and immunoprecipitation , the influence of the expression and trsport function of MDR3 protein with genetic alterations on some specific loci is observed in MDCK cells.The study is expected to understang well the pathogenesis of cholelithiasis and provide possibillity to find the protential therapeutic medicine and gene treatment target.

多耐药蛋白3(MDR3)及其编码基因ABCB4在胆汁淤积及胆囊结石发病中所起作用是目前研究的热点问题。我们前期小样本研究发现肝胆管结石患者MDR3蛋白表达异常，两者间的关系尚不明确。肝胆管结石发病有明显种族及地区分布差异，因此遗传背景的作用值得关注。目前研究发现MDR3蛋白参与肝细胞磷脂跨膜转运，其功能障碍将促进胆囊结石形成，另有证据表明ABCB4基因SNPs与胆囊结石及多种磷脂代谢异常疾病有关。由此推测ABCB4基因SNPs可能参与肝胆管结石形成。本研究拟进行大样本肝胆管结石患者ABCB4基因SNPs筛查和基因连锁不平衡分析，利用定点突变和底物标记等技术，验证特定位点变异对MDR3蛋白表达定位及转运功能的影响，阐明ABCB4基因SNPs与肝胆管结石的关联。上述研究有望拓展对肝胆管结石发病机制的认识，也为寻找潜在的药物或基因治疗靶点提供新的线索。

多耐药蛋白 3(MDR3)及其编码基因 ABCB4 在胆汁淤积及胆囊结石发病中所起作用是目前研究的热点问题。我们前期小样本研究发现肝胆管结石患者 MDR3 蛋白表达异常，两者间的关系尚不明确。肝胆管结石发病有明显种族及地区分布差异，因此遗传背景的作用值得关注。本项目旨在阐明 ABCB4 基因 SNPs 与肝胆管结石的关联。上述研究有望拓展对肝胆管结石发病机制的认识，也为寻找潜在的药物或基因治疗靶点提供新的线索。.本研究拟进行大样本肝胆管结石患者 ABCB4 、ABCB11基因 SNPs 筛查和基因连锁不平衡分析，利用定点突变和底物标记等技术，验证特定位点变异对 MDR3、BSEP 蛋白表达定位及转运功能的影响。. 通过本课题的研究发现ABCB4和ABCB11基因变异在原发性肝胆管结石患者和正常健康人群中存在明显差异，表明ABCB4和ABCB11基因变异可能参与了原发性肝胆管结石的发病。ABCB4和ABCB11基因突变基因型与野生基因型相比，其蛋白的表达水平存在明显差异，表明ABCB4和ABCB11基因变异导致其蛋白表达缺陷，影响肝内胆汁成分的组成进而导致原发性肝胆管结石的发病。MDR3和BSEP蛋白在原发性肝胆管结石患者的肝组织和正常肝组织相比蛋白表达明显降低，说明MDR3和BSEP蛋白表达缺陷可能是原发性肝胆管结石发病的一个重要危险因素。. 研究内容与临床相结合，通过研究ABCB4和ABCB11基因特定位点变异对其相应蛋白MDR3和BSEP蛋白的表达和转运功能的影响，为寻找潜在的药物及基因治疗靶点提供科学依据。. 课题的实施培养了一名硕士研究生。