危险信号相关分子加强防龋DNA疫苗粘膜再次免疫效果和机制

利用分子克隆技术、真核细胞表达技术构建两种危险信号相关分子-趋化因子CCL20和CXCL13的真核表达质粒并在培养细胞中检测相应基因表达和其生物学功能。通过鼻粘膜途径与防龋DNA疫苗同时接种加强免疫，利用抗体和细胞因子检测技术、定菌鼠模型，检测该免疫方式诱导特异性抗体和抑制龋病的能力、诱导的免疫反应的类型与强度，评价该免疫方式的防龋保护能力。以基因芯片技术分析两种趋化因子表达质粒转染树突状细胞后，树突状细胞的基因表达变化；以免疫组化、原位杂交、酶联免疫斑点法（ELISPOT）和定量PCR技术分析该免疫方式对免疫局部和粘膜相关淋巴组织的细胞组成，微环境的影响，探讨两种趋化因子表达质粒可能增强防龋DNA粘膜再次免疫效果的可能机制。