原癌基因SRp20及其种属保守靶基因在口腔黏膜异常增生演变中作用和机制研究

Alternative splicing of pre-mRNA is an important regulation level of the expression of eukaryotic genes.Around 70% of human genes undergo alternative splicing of pre-mRNA. Accumulated evidences indicate that alternative splicing plays important roles in the initiation and developement of cancer. Alternative splicing may be involved in cancer by generating oncogenic unusual proteins, increasing the expression of oncogenes or inactivating tumor suppressor genes.SRp20 is a proto-oncogene and play roles in the regulation of alternative splicing of pre-mRNA. According to our pilot studies, we proposed that SRp20 and its species-conserved target ILF3 may play important role in the progress of the dysplasia of oral mucosa. The purpose of this proposal is to discover the mechanism of controling the initiation and progress of oral mucosa dysplasia by SRp20 through the regulation of alternative splicing of ILF3. This study may provide new targets or methods for the treatment of oral mucosa dysplasia, oral cancer or other cancers.

前体信使RNA的可变剪切是真核基因表达调控的重要方式，大约70%的人类基因都有前体信使RNA的可变剪切。愈来愈多的证据表明可变剪切在癌症的发生发展中起了重要作用。异常的剪切方式可能产生一些致癌性异常蛋白，或者升高癌基因表达水平，或者使抑癌基因失去功能，从而有利于癌症的发生发展。原癌基因SRp20是重要的可变剪切调控蛋白。本项目在前期研究的基础上首次提出SRp20及其进化中种属保守的靶基因ILF3可能在口腔黏膜异常增生演变中起了重要作用。通过采用激光显微切割、荧光定量PCR、RNAi、肿瘤基因芯片、转基因鼠和癌前病变动物模型实验等方法，研究SRp20和其靶基因ILF3的不同异构体在口腔黏膜异常增生演变和口腔癌发生发展中的作用，揭示SRp20通过调控ILF3不同异构体的表达，控制口腔黏膜异常增生和口腔癌的发生发展的机制，为口腔黏膜异常增生、口腔癌及其它癌症的治疗提供新的标靶和思路。

本项目研究了SRp20及其靶基因ILF3在口腔黏膜异常增生和口腔癌中的作用，以及SRp20表达增高的分子机制和SRp20的新的靶基因。本项目发现：1、SRp20（又称SRSF3）与口腔黏膜异常增生和口腔癌的发生发展显著相关；2、SRp20及其靶基因ILF3的异构体在口腔癌中的表达呈正相关；3、体外研究证实了SRp20对于口腔癌细胞生长是必需的，SRp20的外显子4的可变剪切调控异常是导致SRp20在口腔黏膜异常增生和口腔癌中过表达的重要分子机制；4、HnRNP L和STAT3分别从剪切和转录水平上调控SRp20的表达；5、SRp20的靶基因ILF3的可变剪切在口腔癌中也受到SRp20的调控；SRp20还可以调控原癌基因PKM（丙酮酸激酶）和细胞分裂相关基因SPAG5的前体mRNA的可变剪切。这些研究结果较好地揭示了SRp20与在口腔黏膜不典型增生和口腔癌发生发展中的重要作用和SRp20表达增高的分子机制，为口腔黏膜异常增生、口腔癌及其它癌症的治疗提供新的标靶和思路。