RNA可变剪切调控因子hnRNP C在口腔黏膜异常增生演变中的作用和机制研究

Alternative splicing of pre-mRNA is an key regulation way of the expression of eukaryotic genes. Most of human genes undergo alternative splicing of pre-mRNA. More and more evidences indicate that alternative splicing plays key roles in the initiation and developement of cancer. Alternative splicing may participate in cancer by increasing the expression of oncogenes, producing oncogenic unusual proteins, or deactivating tumor suppressor genes.hnRNP C is an important splicing factor.It has been shown that hnRNP C is involved in the development and metastasis of cancer. According to our pilot studies, we proposed that hnRNP C may play important role in the progress of the dysplsia of oral mucosa. The goal of this proposal is to undercover the functions and mechanisms of controling the initiation and progress of oral mucosa dysplasia by hnRNP C. This study may find new targets or ways for the treatment of oral cancer and oral mucosa dysplasia.

前体mRNA(pre-mRNA)的可变剪切是真核基因表达调控的重要方式。大部分人类基因都有前体mRNA的可变剪切。很多研究都表明可变剪切在癌症的发生发展中起了重要作用。前体mRNA剪切方式的异常改变可能产生或上调一些致癌性蛋白，或者失活抑癌基因，而有利于癌症的发生发展。核内不均一核糖核蛋白C（hnRNP C）是重要的可变剪切调控蛋白。研究表明hnRNP C与肿瘤发生和转移有关。本项目在前期研究的基础上提出hnRNP C可能在口腔黏膜异常增生演变中起了重要作用。我们将采用免疫组织化学、荧光定量PCR、RNAi、裸鼠和转基因鼠等实验方法，研究hnRNP C在口腔黏膜异常增生和肿瘤组织中的表达模式和作用，揭示hnRNP C参与口腔黏膜异常增生和口腔癌的发生发展的机制，为口腔黏膜异常增生、口腔癌及其它癌症的治疗提供新的标靶和思路。

RNA可变剪接是人类基因表达调控的重要方式，在肿瘤的发生发展中起了重要作用。hnRNP C是重要的可变剪切调控蛋白，它自身的外显子4的可变剪接产生C2和C1两个亚型。本项目研究了hnRNP C及其亚型在口腔黏膜异常增生和肿瘤组织中的表达模式和作用，hnRNP C参与口腔黏膜异常增生和口腔癌发生发展的机制。本项目发现：1、hnRNP C2在口腔癌细胞和组织中的表达显著高于正常细胞和组织。C2相对高表达的患者生存时间显著低于C2相对低的患者。在口腔黏膜异常增生组织中C2的表达水平也是显著高于正常黏膜组织。进一步C2/C1的比例在异常增生和口腔癌组织中都是显著高于口腔正常黏膜组织；C2在口腔正常黏膜到黏膜异常增生，再到口腔癌的发展过程中起了重要作用。2、首次发现hnRNP C的两个亚型在口腔癌中具有不同作用，C2是促癌基因，而C1是抑癌基因，抑制C2的表达可以显著抑制肿瘤的发生发展。3、首次发现了hnRNP C的主要靶基因FOXM1的亚型FOXM1a是抑癌基因，增加FOXM1a的表达对肿瘤发生发展有显著的抑制作用，并发现了hnRNP C2通过FOXM1外显子9上的调控序列抑制其剪接和FOXM1a的表达。4、首次发现了原癌基因SRSF3和SRSF1可以调控hnRNP C的外显子4的可变剪接，可以促进具有癌基因功能的C2的表达。SRSF3是通过促进SRSF1的表达来促进C2的剪接，并发现了运用反义寡核苷酸抑制SRSF3表达的新方法。这些研究结果较好地揭示hnRNP C特别是C2亚型参与口腔黏膜异常增生和口腔癌的发生发展的机制，为治疗和预防口腔黏膜异常增生、口腔癌及其它癌症新的标靶和思路。