tPA预适应对细胞周期重返所致的神经元凋亡的作用及机制研究

组织型纤溶酶原激活剂（tPA）是迄今为止唯一被美国FDA批准用于治疗急性缺血性中风的溶栓药物。近年来研究表明tPA除具有溶栓功能外，还作为细胞因子在脑缺血中发挥多方面作用，但其机制尚待进一步的研究。我们的前期结果表明，在缺血或缺氧之前短时地给予tPA可以诱导神经元对后续的缺血缺氧产生耐受性，明显减少细胞凋亡，提高神经元的存活率，称为tPA预适应。进一步研究发现，tPA预适应与抑制细胞周期重返（cell cycle reentry）有关。本课题旨在前期工作的基础上，利用流式细胞术、免疫印迹、Real-time PCR、confocal、TUNEL、RNA干扰等方法研究tPA预适应在缺血神经元细胞周期重返中的作用，阐明相应的机制并且明确这一作用对神经元凋亡的影响。该研究将从新的视点探讨tPA对缺血脑损伤的作用及机制，尤其是其神经保护作用的机制，且对临床上tPA的合理应用具有重要的指导意义。

组织型纤溶酶原激活剂（tPA）是一种丝氨酸蛋白激酶，可以激活纤溶酶原成为有活性的纤溶酶，后者具有溶栓作用。所以tPA是目前唯一被美国FDA批准的用于急性缺血性卒中进行溶栓治疗的药物。我们在前期的研究中发现在小鼠缺血脑组织中，在缺血或缺氧之前短暂地给予tPA可以诱导神经元对后续的缺血缺氧产生耐受性，提高神经元的存活率，称为tPA预适应。我们通过本课题的研究进一步证实了tPA的保护作用，并且阐明了其作用的机制。我们发现脑缺血时细胞周期蛋白被激活，从而引起细胞周期重返，最终导致细胞凋亡。而tPA预适应通过plasmin及NMDA-R作用引起TNFα激活，后者进一步引起HIF1α的激活，从而使HIF1α调节的细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶抑制剂P21表达升高。从而阻止缺血脑组织中由于细胞周期重返而导致的神经元坏死。这些研究结果进一步补充了脑缺血发病的病理生理机制，为tPA在临床更为合理的应用提供了理论依据，同时为缺血性卒中药物研发提供了新的靶点。