microRNA对不成熟树突状细胞分化基因的调控机制

树突状细胞（DC）做为专职抗原递呈细胞，可有效刺激T细胞分化并产生免疫应答。研究发现不成熟DC在诱导机体免疫耐受过程中发挥了重要作用，但决定/控制DC抑制免疫应答的机理尚不完全清楚。本课题组在前期运用表观遗传修饰抑制DC成熟，介导T细胞无能的技术平台上，对DC分化过程中表达差异的miRNA进行芯片扫描和real-time PCR验证，并平行研究了与DC激活途径相关的基因（NF-kB、TLR）、负性调控基因（SOCS、TGF-β）、细胞内信号传导通路（JAK/STAT）的变化规律，拟进一步结合分子生物学技术分析预测miRNA可能作用的基因靶点。本研究将从一个新的视角揭示DC分化过程中的分子调控规律，不仅有助于我们建立更为高效的体外分化体系，也有助于我们更好的理解不成熟DC在免疫耐受中的作用，为探索诱导移植免疫耐受新方法奠定理论基础。

树突状细胞（Dendritic cells, DC）作为一类功能最强的专职抗原递呈细胞，在识别和递呈抗原、启动免疫应答、诱导移植排斥反应中起着重要的作用。DC成熟状态的不同不仅决定着T细胞的激活，而且还决定了T细胞免疫应答的最终发展方向。但决定/控制DC抑制免疫应答的机理尚不完全清楚。microRNA(miRNA)是广泛存在于生命体内的一种正常调节机制，其经典的功能是对个体发育的调控。miRNA作为一种广泛存在的对基因表达进行微调的分子，操纵着人类约20％－30％的基因表达。因此我们设想miRNA可能在DC分化过程中发挥了重要的作用，这为在体外有效地干预DC成熟过程并诱导移植免疫耐受/免疫应答提供一个新的研究方向。本课题组在前期运用表观遗传修饰抑制DC成熟，介导T细胞无能的技术平台上，对DC分化过程中表达差异的miRNA进行芯片扫描和real-time PCR验证。并通过树突状细胞基因芯片技术平行研究了与DC激活途径相关的基因以及负性调控基因的变化规律。进一步结合分子生物学技术分析预测miRNA可能影响的与DC成熟过程密切相关的基因靶点。我们通过增强及抑制试验干预Let-7a表达可以影响DC活化基因CCR7和TRAF6的表达。具体表现为抑制Let-7a表达可使DC成熟细胞表型CD80、CD83、HLA-DR、CD1a表达升高。并且IL-12和IFN-γ分泌量增加，而抑制性因子IL-10分泌量减少。因此抑制Let-7a可通过CCR7和TRAF6途径促进DC的成熟，进而增强T细胞的抗肿瘤效应。相反增加Let-7a表达可有效地抑制DC的成熟。本研究从一个新的视角揭示DC分化过程中的分子调控规律，不仅有助于我们建立更为高效的体外分化体系，也有助于我们更好的理解DC在免疫应答中的作用，为探索通过DC途径诱导免疫应答/移植免疫耐受的新方法奠定理论基础。