滤泡辅助性T细胞辅助FMD表位疫苗B细胞免疫的机制研究

辅助性T细胞（Th）辅助B细胞免疫是FMD表位疫苗提供长期保护的基础，但Th细胞是如何辅助B细胞的?对维持长时间的体液免疫应答是如何发挥作用的?其机制都不清楚。滤泡辅助性T细胞(Tfh )是新近证实的位于淋巴滤泡、表型为CXCR5+CD40L+ICOS+的T细胞亚群，是在生发中心(GC)中辅助B细胞产生对Ｔ细胞依赖抗原应答中的主要角色。本研究以我们前期获得的重组FMD表位疫苗为抗原材料，免疫小鼠后通过流式细胞术、免疫荧光显微技术、Real-time RT-PCR及ELISA方法观察小鼠Tfh和B细胞在外周血和GC中的定位和功能特点，明确Tfh和B细胞在FMDV抗原免疫应答中的相互作用。通过阻断ICOS/ICOSL和IL-21/IL-21R的通路，探讨Tfh辅助FMD表位疫苗B细胞免疫应答的分子机制，为进一步研究Tfh对表位疫苗维持长时间体液免疫应答的作用机制以及为新型疫苗设计提供理论基础。

滤泡辅助性T细胞(Tfh )是新近证实的位于淋巴滤泡、持续高表达CXCR5的T细胞亚群，是在生发中心(GC)中辅助B细胞产生对Ｔ细胞依赖性抗原应答的主要角色。Tfh细胞在口蹄疫（FMD）疫苗免疫应答中是否发挥重要作用还不清楚。本研究以FMD重组疫苗为抗原材料，通过流式细胞术，免疫荧光，Real time-PCR、ELISA技术观察了小鼠免疫FMD重组疫苗后第0、4、7、14、21、28d Tfh细胞和GC B细胞的分化情况，试验结果显示，小鼠免疫FMD表位疫苗后的能诱导Tfh细胞和GC B细胞的分化，提高细胞因子IL-4和IL-21的表达水平，促进IgG1的分泌水平，增强Tfh细胞转录因子Bcl-6 mRNA的表达水平，促进生发中心的形成。为了进一步证实Tfh细胞在口蹄疫疫苗免疫应答中发挥的作用，通过抗体阻断ICOS/ICOSL和IL-21/IL-21R的通路，观察Tfh细胞及GC B细胞的分化，结果表明，阻断ICOS/ICOSL和IL-21/IL-21R的通路能明显抑制Tfh细胞和GC B细胞的分化，本研究证实Tfh细胞在FMD重组疫苗免疫应答中发挥十分重要作用，为进一步研究Tfh细胞对FMD疫苗维持长时间体液免疫应答的作用机制以及为FMD新型疫苗设计提供理论基础。