硒蛋白P受体的分离、鉴定和功能的研究

硒蛋白P是一种血浆硒蛋白，人血浆总硒量的50-60%存在于硒蛋白P中。它在肝脏合成、分泌至血浆后，能转运到机体不同细胞。在细胞内作为重要的抗氧化剂分子，参与细胞内许多的代谢过程。硒蛋白P含多个硒代半胱氨酸，而编码硒代半胱氨酸的密码子为中止密码子，很难在体外表达全长蛋白分子。我们首次分离纯化了完整硒蛋白P蛋白分子。根据已有的研究结果，我们提出细胞膜上可能存在硒蛋白P的受体。为验证这一设想，我们将表达纯化的硒蛋白P偶联到乳胶纳米微球上，利用这种方法特异性与细胞膜蛋白免疫共沉淀，进而分离和纯化硒蛋白P受体；采用HPLC-MASS和NMR等技术对分离到的受体进行分析鉴定，然后再克隆受体基因、蛋白表达和抗体制备。在此基础上，我们将深入研究硒蛋白P与受体相互作用后进入细胞的转运途径，了解其参与细胞代谢的分子基础。