酪氨酸蛋白磷酸酶SHP-1对人子宫肌重构和收缩的调节作用及其机制研究

人类分娩启动机制尚未阐明。妊娠末期子宫肌重构导致子宫由静息态向收缩态的转化，是分娩的重要始动因素。在这一过程中，很多分子的表达和磷酸化发生改变，其调节机制尚不明了。酪氨酸蛋白磷酸酶SHP-1可以调节靶分子的磷酸化水平，从而影响多种细胞的重构和收缩。我们前期的研究发现，SHP-1在人未孕子宫肌中不表达，而在妊娠子宫肌中高表达，且其表达水平在临产时显著下降，提示SHP-1可能是影响人类妊娠和分娩的重要分子。本课题在明确SHP-1于临产和未临产子宫肌表达和分布的基础上，以体外培养的子宫平滑肌细胞为模型，运用Realtime PCR、Western Blot、RNA干扰、MTS、流式细胞术、子宫肌条和细胞张力与[Ca2+]同步测定、免疫共沉淀等方法，深入探讨SHP-1对子宫肌增殖、凋亡、重构以及收缩的调节作用及其机制，以期进一步揭示人类分娩启动机制，为临床相关疾病的防治提供新的思路和治疗靶点。

早产（preterm labor）是导致新生儿疾病和死亡的最主要因素，然而目前对早产的防治仍没有行之有效的措施，阐明人类分娩启动机制对早产的防治具有重要的临床意义和社会价值。子宫肌由妊娠期维持的静息态向收缩态的转化，是分娩启动的最后“公路”。然而，这一转化发生的机制，目前尚不十分清楚。.我们的研究发现，Src同源区蛋白磷酸酶（SHP）-1在临产子宫肌中表达与未临产相比显著降低；在原代子宫平滑肌细胞中敲低SHP-1后，与细胞增殖和粘附有关的通路均得到了富集。在小鼠妊娠第14.5天腹腔注射SHP-1的特异性抑制剂PTPI-1可以诱发早产，并迅速升高（<8h）子宫肌增殖相关蛋白MAPKs ERK1/2、JNK1/2和PI3K-p85的磷酸化水平，但在分娩时恢复至正常水平；而与子宫肌重构密切相关的蛋白黏附斑激酶FAK的磷酸化水平升高可持续至分娩；电镜观察发现注射了PTPI1的小鼠，其平滑肌细胞间致密斑的数量和密度显著高于对照组，提示SHP-1在妊娠早中期主要参与对细胞增殖的调节，而在妊娠末期则可通过调节FAK影响子宫肌细胞的重构，加强细胞间的紧密连接，从而易化宫缩。前列腺素是调节子宫肌重构，诱发宫缩的重要炎性介质。在未临产子宫肌中，PGE2和PGF2α对SHP-1的表达具有相反的调节作用：PGE2可增加SHP-1的表达，其作用是由EP1/EP3型受体介导的；而PGF2α则减少SHP-1的表达，这一作用是由FP激活Gq蛋白进而活化下游的PLCβ−PKC−NF-κB和PI3K- NF-κB信号通路所介导的。本研究首次阐明了SHP-1在妊娠期子宫肌重构中的重要作用，为理解子宫在妊娠末期由静息向收缩转化的机制，以及早产的防治提供新的靶点。. H2S作为继NO和CO之后发现的第三种气体分子，在生物体内具有相当广泛的生理作用。我们对H2S在妊娠维持和分娩启动中的作用进行了研究。发现H2S可通过下调胎盘滋养层细胞中miR-200c，miR-20a/b的表达，从而间接增加其靶蛋白VEGF的生成，进而促进血管内皮细胞的增殖、迁移和管型形成。在妊娠后期，H2S还可通过抑制宫内组织炎性细胞因子的合成和分泌发挥抗炎作用，延迟内毒素（LPS）诱导的早产。这一研究为H2S在先兆子痫和早产防治中的应用奠定了一定的理论基础。.本课题共形成论文4篇，已发表2篇，另有2篇在投。协助培养博士研究生3名。