CRH不同亚型受体对胎盘葡萄糖转运体表达和功能的调节作用及其机制研究

葡萄糖转运体介导的葡萄糖跨胎盘转运是胎儿宫内生长发育过程中营养需求的主要来源。胎盘葡萄糖转运体在妊娠期间的表达具有时间特异性，其时序性表达的紊乱会导致胎儿发育的异常。然而人类胎盘葡萄糖转运体的调节目前尚知之甚少。CRH是人类胎盘特有的内分泌激素，其分泌在妊娠期间也具有时序性，我们前期的研究发现CRH可以增加胎盘细胞GLUT1的表达，减少GLUT3和GLUT8的表达。因此CRH可能是影响葡萄糖转运体在胎盘时序性表达的重要因子。本课题以体外培养的胎盘合体滋养层细胞为模型，用放免测定、实时定量PCR、Western Blot、免疫共沉淀、免疫荧光、RNA干扰等方法，研究CRH 对胎盘细胞葡萄糖转运的影响，明确CRH两型受体对葡萄糖转运体不同亚型表达和功能的调节作用，探讨所涉及的细胞内信号转导通路，揭示胎盘葡萄糖转运体在妊娠期间时序性表达的上游调节机制，可以为临床上相关疾病的防治提供新的思路。

葡萄糖转运体介导的葡萄糖跨胎盘转运是胎儿宫内生长发育过程中营养需求的主要来源,但人胎盘葡萄糖转运体的调节目前尚知之甚少。CRH是人类胎盘特有的内分泌激素，在调控人类妊娠过程和胎儿生长发育中起着重要作用。本课题首先证实了葡萄糖转运体两种亚型GLUT1和GLUT3在人足月分娩胎盘中的表达。发现CRH可以增加胎盘细胞GLUT1的mRNA和蛋白表达，CRH和其相关肽urocortin（UCNI）都可降低GLUT3的表达。用CRH或UCNI的抗体中和内源性的多肽，或用CRH受体的广谱拮抗剂astressin处理细胞，均可减少GLUT1的表达而增加GLUT3的表达。CRH-R1的特异性拮抗剂antalarmin或用特异性siRNA敲低CRH-R1均可减少GLUT1的表达而增加GLUT3的表达；CRH-R2的拮抗剂astressin2b或用特异性siRNA敲低CRH-R2均可增加GLUT1和GLUT3的表达。CRH-R1可激活Galphas/AC和Galphaq/PLC信号通路，而CRH-R2则可激活Galphai和Galphaq信号通路。我们的研究表明，胎盘产生的内源性CRH及其相关肽可以自分泌或旁分泌的形式调节葡萄糖转运体GLUT1和GLUT3的表达，CRH-R1和CRH-R2在此调节中起着不同的作用，这种不同作用产生的原因可能是由于CRH-R1和CRH-R2在胎盘细胞中偶联于不同的G蛋白，进而激活不同的细胞内信号通路所致。胎盘分泌的CRH及其相关肽可通过对GLUTs的调节影响妊娠过程中胎儿和胎盘的营养转运和生长发育。这一研究阐明了胎盘葡萄糖转运体在妊娠期间时序性表达的上游调节机制，可以为临床上相关疾病的防治提供新的思路。