STAT1信号途径介导的乙肝病毒靶细胞的损伤及分子机制的研究

宿主通过清除被病毒感染的靶细胞防止病毒播散。我们前期研究发现：经乙肝病毒（HBV）基因组转染的细胞，在肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）作用下发生的细胞损伤过程，系依赖于STAT1（信号传导及转录活化因子）。.本项目拟进一步研究STAT1信号途径介导的HBV转染细胞损伤的可能机制。即：①利用STAT1缺陷型细胞体系，研究与HBV转染细胞损伤有关的STAT1途径的蛋白因子；②采用特异性SiRNA分别阻断TRAIL通路蛋白Caspase3和Caspase8通路，研究STAT1信号是否经由Caspase通路导致靶细胞损伤；③利用HBV复制的细胞模型，研究诱致靶细胞损伤的HBV蛋白；④利用双向凝胶电泳技术和蛋白质谱分析,研究STAT1途径正常与缺陷型细胞的蛋白质差异表达。.本项目的实施有助于揭示STAT信号途径依赖的HBV转染细胞损伤的可能机制，并可能为HBV感染防治研究提供新的路径。

宿主通过清除被病毒感染的靶细胞防止病毒播散。本课题前期研究发现：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）对乙肝病毒（HBV）复制的靶细胞损伤，依赖于信号传导及转录活化因子1（STAT1）通路的完整性。.本课题组从四个方面探讨STAT1信号通路与HBV靶细胞损伤的相关性，研究结果表明： STAT1信号通路完整时，低浓度TRAIL导致HBV靶细胞中STAT1及pSTAT1蛋白表达上调，同时伴随干扰素调节因子IRF-7表达增加和IRF-3表达减少；TRAIL可降低HBV靶细胞中Procaspase 3、Procaspase 8、Procaspase 9的表达，而活化形式的Cleaved Caspase 3表达增加；MTT及流式细胞学分析提示HBV 基因组中S及C抗原表达与TRAIL介导的靶细胞损伤可能有关；定量蛋白组学分析提示低浓度TRAIL导致Chimera 1、Sideroflexin-5、VKORC1等表达明显减少，而Centrosomal protein、AGPAT4表达增加。.本课题研究结果提示STAT1信号通路依赖的致HBV靶细胞损伤的可能机制，可能为HBV感染防治研究提供新的途径。