Lyn介导的信号途径对哮喘气道高分泌的分子机制研究

粘液高分泌是严重哮喘发作面临的首要问题，目前由于缺乏有效与特异性针对哮喘粘液高分泌的治疗手段，如何抑制粘液高分泌成为哮喘防治急需解决的关键问题。Lyn激酶与多种信号途径有关，在哮喘发病机制中可能起重要调节作用。在前期研究中，我们利用Lyn基因敲出小鼠，建立了气道重塑的动物模型。研究发现Lyn基因敲出明显增强STAT6，PI3K/Akt, Smad信号途径, 参与了气道高分泌。但Lyn对STAT6，PI3K/Akt,和Smad信号途径和粘液高分泌的具体调节机制有待深入研究。本研究在前期研究基础上，分析哮喘患者Lyn表达与相关信号途径和MUC5AC表达关系，通过Lyn表达质粒和阴性调节质粒，采用免疫沉淀等技术，分析Lyn对STAT6, PI3K/Akt, Smad,MUC5A调节作用。这些研究对于阐明Lyn在哮喘气道高分泌作用机制和发现新的治疗靶点具有重要的作用。

粘液高分泌是严重哮喘发作面临的首要问题，目前由于缺乏有效与特异性针对哮喘粘液高分泌的治疗手段，如何抑制粘液高分泌成为哮喘防治急需解决的关键问题。Lyn激酶与多种信号途径有关，在哮喘发病机制中可能起重要调节作用。我们利用Lyn基因敲出小鼠，建立了气道重塑的动物模型。研究发现Lyn基因敲出明显增强STAT6，PI3K/Akt, Smad信号途径, 参与了气道高分泌。但Lyn对STAT6，PI3K/Akt,和Smad信号途径的具体调节机制有待深入研究。本研究分析哮喘患者Lyn表达与相关信号途径和MUC5AC表达关系，通过Lyn表达质粒和阴性调节质粒，采用免疫沉淀等技术，分析Lyn对STAT6, PI3K/Akt, Smad调节作用。结果显示： Lyn 基因敲出鼠（Lyn KO）其气道MUC5AC表达明显增加； Lyn激酶在哮喘病理过程中，对PI3K，Akt, STAT6, 磷酸化Akt，NF-B，磷酸化NF-B, TGF-3 , 磷酸化STAT1和Smad表达具有明显的阴性调节作用；首次报道Lyn激酶调节TGF-β3，在哮喘气道重塑作用，为支气管哮喘治疗提供了新的治疗靶点；同时研究发现： IL-4和IL-13能有效增加气道上皮细胞MUC5AC表达，Lyn基因缺乏明显增加IL-4和IL-13能有效增加气道上皮细胞MUC5AC表达， Lyn基因缺乏明显增加IL-4和IL-13诱导气道上皮细胞STAT6表达与磷酸化， Lyn过表达能减少IL-4和IL-13诱导气道上皮细胞MUC5AC表达，其机制与Lyn过表达下调STAT6表达与磷酸化有关，Lyn激酶通过调节STAT6参与IL-4/IL-13诱导的MUC5AC表达。进一步研究表明： TGF-β1，TGF-β2和TGF-β3能有效增加气道上皮细胞MUC5AC表达，Lyn基因缺乏明显增加TGF-β2和TGF-β3诱导的气道上皮细胞MUC5AC表达， Lyn基因缺乏明显增加TGF-β2和TGF-β3诱导的气道上皮细胞Smad2/3表达和磷酸化， Lyn过表达能有效降低TGF-β2和TGF-β3诱导的气道上皮细胞MUC5AC表达，其机制与Lyn过表达小调气道上皮细胞Smad2/3表达和磷酸化有关，在卵清蛋白诱导小鼠气道变态反应模型中，Lyn转基因小鼠与野生型小鼠相比，Lyn转基因小鼠显示其肺组织TGF-β2和TGF-β3表达明显减