白菜核雄性不育基因的分子鉴别、克隆和序列分析

本项目采用DD-PCR技术、PCR技术和RACE技术等，分别从白菜基因组DNA和RNA入手，进行了核雄性不育基因的分子鉴别、克隆与序列分析。观察了白菜核不育两用系花药和小孢子的发育过程，确定了小孢子的败育时期和败育形态；建立了稳定的白菜DD-PCR反应体系；筛选了20个差异显示分析引物，获得了3条特异的cDNA电段（B0302B=B0311A和B0320B），其中B0302B和B0320B为可育株特有的，B0311A为不育株特有，经测序后，设计特异引物进行RACE分析，得到cDNA全长；通过400个引物的筛选，获得了一个与育性基因连锁的684bp的DNA片段，和一个与不育基因连锁的511bp的DNA片段，Southern杂交证明它们在基因组中都是低拷贝的。研究表明该不育的分子机制比较复杂。