叶酸缺乏致Dnmt3a表达上调在肝细胞恶性转化中的作用及机制研究

Epidemiological studies show that folate deficiency is one of the risk factors in hepatocellular carcinoma. Our preliminary results suggest that folate deficiency can lead to upregulation of DNA methyltransferase 3a (Dnmt3a) in rat liver tissue. As an important de novo methyltransferase, the close relationship between the abnormal expressions of Dnmt3a and a variety of tumor development was confirmed in numerous studies. This research intend to observe the effects of folate deficiency on rat liver cell malignant transformation on the basis of our previous studies, and detecting modifications of Dnmt3a in this process. In addition, through interfering or overexpressing Dnmt3a in folate deficient human hepatocyte model and normal liver cell lines, analyze cell morphological and biological behavior changes to identify the effects of Dnmt3a in folate deficiency induced malignant transformation of liver cells in rats. And by detecting the methylation and expression level of factors related to malignant transformation of hepatocytes, explore potential underlying mechanisms of Dnmt3a upregulation induced by folate deficiency in malignant transformation of liver cells, thus providing a new theoretical basis for the primary prevention of hepatocellular carcinoma, or it may also provide potential molecular markers for the early diagnosis and treatment of hepatocellular carcinoma.

国内外流行病学研究表明叶酸缺乏是肝癌易感因素之一。本人前期研究结果表明，叶酸缺乏可以导致大鼠肝脏组织中DNA甲基转移酶3a（Dnmt3a）表达上调。Dnmt3a作为一种重要的重新甲基转移酶，其表达异常与多种肿瘤发生发展之间的密切关系在多项研究中被证实。本课题拟在前期研究的基础上，观察叶酸缺乏对大鼠肝细胞恶性转化的影响，并检测此过程中Dnmt3a表达的变化。另外，构建叶酸缺乏人肝细胞模型，在此细胞模型和正常肝细胞株中干扰或过表达Dnmt3a，分析细胞形态学改变、生物学行为变化，明确Dnmt3a在叶酸缺乏导致肝细胞恶性转化中的作用。并通过检测与肝细胞恶性转化相关因子的甲基化水平及其表达差异，初步探讨叶酸缺乏致Dnmt3a表达上调在促进肝细胞恶性转化中的可能机制，从而为肝癌一级预防提供新的理论依据，也或可为肝癌早期诊断及治疗提供潜在的分子标记物。

国内外流行病学研究表明叶酸缺乏是肝癌易感因素之一。本人前期研究结果表明，叶酸缺 乏可以导致大鼠肝脏组织中DNA甲基转移酶3a(Dnmt3a)表达上调。Dnmt3a作为一种重要的重 新甲基转移酶，其表达异常与多种肿瘤发生发展之间的密切关系在多项研究中被证实。本课题在前期研究的基础上，观察叶酸缺乏对大鼠肝细胞恶性转化的影响，并检测此过程中Dnmt3a 表达的变化。另外，构建叶酸缺乏人肝细胞模型，在此细胞模型和正常肝细胞株中干扰或过表达Dnmt3a，分析细胞形态学改变、生物学行为变化，明确Dnmt3a在叶酸缺乏导致肝细胞恶性转化中的作用。并通过检测与肝细胞恶性转化相关因子的甲基化水平及其表达差异，初步探讨叶酸缺乏致Dnmt3a表达上调在促进肝细胞恶性转化中的可能机制。在前期研究基础上进一步证实叶酸缺乏可导致大鼠肝脏损伤，促进大鼠肝癌的发生发展。叶酸缺乏可导致大鼠肝脏Dnmt3a表达水平上调, Dnmt3a启动子区域甲基化水平降低，并且主要发生在CpG岛。敲低Dnmt3a可抑制肝癌细胞的侵袭、转移能力，从而为肝癌一级预防提供新的理论依据，也或可为肝癌早期诊断及治疗提供潜在的分子标记物。