脂联素与LOX-1信号通路间的Cross-talk及其在动脉粥样硬化中的作用

脂联素是脂肪细胞分泌的多功能生物活性蛋白，具有显著的抗动脉粥样硬化（Atherosclerosis,AS）作用。LOX-1是AS发病过程中的关键受体之一。我们前期的整体动物研究提示脂联素与LOX-1信号通路之间可能存在相互调节的Cross-talk，脂联素对LOX-1的调节可能是其抗AS的新机制。本课题拟通过体外培养的细胞进行深入研究： ① 证实脂联素与LOX-1信号转导通路间的Cross-talk。② 寻找和鉴定介导此Cross-talk的可能的信号分子，并探讨其可能的作用与机制。③ 探讨此Cross-talk在内皮细胞激活、损伤、功能失调、单核-内皮黏附、泡沫细胞形成等AS发病关键过程中的作用。这将有助于建立脂联素与LOX-1两条信号通路间的Cross-talk，有助于从LOX-1通路阐明脂联素抗AS的新机制，为以脂联素和LOX-1为靶点的抗AS创新药物研发提供新的理论支持和研究思路。

LOX-1在内皮细胞激活、损伤与凋亡、单核-内皮细胞粘附等动脉粥样硬化（AS）发生、发展的关键过程中起重要作用。脂联素具有显著血管保护作用。我们前期研究结果提示，脂联素可能通过调节LOX-1等发挥血管保护作用。本研究以ox-LDL、脂多糖（LPS）、棕榈酸（PA）、TNFα等为LOX-1刺激剂，从内皮炎症、功能失调以及凋亡等方面，探讨了LOX-1的表达的调节与机制、脂联素对LOX-1的调节作用、机制及其在防治AS中的意义。本研究的主要研究结果：（1）LPS对内皮LOX-1调节的作用与机制研究：发现了LPS可显著诱导内皮LOX-1 mRNA、蛋白表达增加；明确了内皮LPS受体TLR4及其适配蛋白MyD88介导LPS诱导LOX-1表达中的作用，而TLR2无明显作用；阐明了活性氧（ROS）、p38MAPK和NF-κB通路在其中的作用；确证了LPS诱导的LOX-1介导了ox-LDL内吞和单核-内皮粘附。（2）脂联素抑制PA诱导内皮炎症的作用与机制研究：以PA作用于内皮细胞，可显著诱导TNF-α、白介素6（IL-6）、细胞间粘附分子-1（ICAM-1）的表达，引起内皮炎症；PA诱导内皮ROS生成、NOX2、 IKKβ、NF-κB p65、p38 MAPK、IRS-1表达；脂联素可以显著改善PA诱导的内皮炎症，保护内皮细胞。（3）脂联素抑制ox-LDL诱导的LOX-1表达作用与机制研究：发现脂联素可剂量依赖性抑制ox-LDL诱导的内皮LOX-1、ICAM-1、血管细胞粘附分子-1（VCAM-1）和E-选择素的表达；脂联素可显著抑制ox-LDL诱导的单核-内皮细胞之间的粘附；Ox-LDL诱导的ROS的生成也可被脂联素所抑制；确定了脂联素通过抑制ox-LDL对NF-κB的激活抑制LOX-1的表达。（4）脂联素对TNFα诱导的内皮LOX-1表达的影响：明确了脂联素可显著抑制TNFα诱导的内皮LOX-1表达；初步确定其机制可可能与抑制ROS生成有关。（5）对脂联素的抗炎方面的生物活性进行评述，对其在风湿性关节炎中的预防、诊断和治疗价值做了系统分析。结果发表在著名杂志《Cytokine & Growth Factor Reviews》。（6）首次采用网络药理学方法和策略，构建了脂联素信号通路网络，研究了其信号网络的拓扑特征和性质，揭示了其信号通路中的潜在药物靶点。