双特异性抗体抑制HIV感染和靶向杀伤HIV的研究

利用噬菌体展示技术筛选出人源抗HIV gp120蛋白和抗补体C3d分子的ScFv单链抗体，将两种抗体的VH、VL基因与人IgG1 Fc基因片段连接后克隆到表达载体pEE14.1中，形成"IgG"型双特异性抗体，利用假病毒中和实验荧光定量检测法、MTT比色法检测双特异性抗体抑制HIV感染和激活补体介导的病毒溶解作用。最终将筛选出有抑制HIV活性且对艾滋病治疗有价值的抗HIV双特异性抗体。此抗HIV双特异性抗体的优势在于：不仅可以直接与HIV病毒粒子特异性结合来抑制病毒感染，而且可通过局部激活补体来靶向杀伤HIV病毒，属HIV研究领域的首次应用，这将为寻求有效的防治HIV病毒感染提供新的策略与思路，对于抗HIV的感染和艾滋病治疗具有潜在的应用价值和市场前景。

利用噬菌体展示技术筛选出人源抗HIV gp120蛋白和抗补体C3d分子的ScFv单链抗体，将两种抗体的VH、VL基因与人IgG1 Fc基因片段连接后克隆到表达载体pEE14.1中，形成"IgG"型双特异性抗体，利用假病毒中和实验荧光定量检测法、MTT比色法检测双特异性抗体抑制HIV感染和激活补体介导的病毒溶解作用。抗HIV双特异性抗体仍无生物活性，具体原因尚未清楚，目前仍在研究进程中。得到了较好的抗HIV gp120蛋白的抗体HY498, 用于噬菌体抗体库的特异性富集和筛选的抗原为真核表达的重组HIV gp120蛋白，来自B/C重组型HIV-1病毒株CN54（简称为CN54-gp120），这种针对于中国B/C亚型主要流行株的具有中和活性的抗体在国际中尚无报道，因此本课题部分工作在纯化、分析这株抗HIV gp120蛋白的抗体。目前已申请专利，研究结果正在整理中待发表论文。