重组抗HIV双功能抗体样融合蛋白的研究

本研究旨在获得可介导细胞毒性T淋巴细胞靶向杀伤HIV的双功能抗体样融合蛋白。为此经PCR扩增出HIV结合区的人CD4基因（600bp）并在E.coli中表达，表达量为细菌总蛋白的24.8%，纯化后，表达产物的纯度达92%。另外，在PCR扩增出抗人CD3单抗重、轻链可变区基因（Vh、Vl）的基础上，用重叠延伸PCR法将二者拼接为单链抗体（SCFV）基因，对该基因表达产物的活性测定表明，其具有CD3结合活性 ，在此基础上，采用PCR重叠延伸法构建了CD4-SCFV双功能融合蛋白基因，DNA序列分析后将其克隆于PGEX-4T-3载体，在E.coli中表达出72KD的GST融合蛋白，酶切获约48KD的双功能抗体样融合蛋白。正进行该融合蛋白分子的活性测定工作。