癌痛消方调控肝癌血管正常化与微环境的实验研究

转移复发是影响肝癌患者长期生存的关键。一些抗血管生成药物被发现能使肿瘤血管短暂正常化，改善肿瘤微环境，为化疗药等药物的干预提供了一个关键的治疗"窗口期"。寻找能使肝癌血管持续正常化的药物和方法将大大提高肝癌的临床疗效，延长肝癌患者生存期。前期研究表明癌痛消方具有抑制血管生长的作用。本研究采用Walker-256建立大鼠移植性肝癌模型，癌痛消方灌胃给药后，采用荧光素示踪法观察不同时间点荧光素在肿瘤中的弥散， RT-PCR检测肿瘤HIF-1α、VEGFmRNA水平，免疫组化法检测MVD。同时体外二氯化钴诱导体外培养微血管内皮细胞缺氧，癌痛消方含药血清进行干预，观察HMEC-1细胞的成管能力，Western-blot方法检测PHD2、HIF-1α、VEGF蛋白表达水平。本研究旨在明确癌痛消方通过干预血管生成和缺氧微环境促使肝癌微血管持续正常化，为肝癌的中医药治疗提供新的研究思路和方法。

转移复发是影响肝癌患者长期生存的关键。寻找能使肝癌血管持续正常化的药物和方法将大大提高肝癌的临床疗效，延长肝癌患者生存期。前期研究表明癌痛消方具有抑制血管生长得作用。本实验从干预肝癌血管生成及微环境角度研究癌痛消的抗癌机制，采用体内动物实验和体外细胞培养方法进行实验研究，研究发现：（1）癌痛消方能通过抑制肝癌血液弥散，有效降低肝癌组织中MVD，VEGF的表达，且随着用药时间的延长，MVD值、VEGF值下降明显。表明癌痛消方通过调控肝癌瘤体组织MVD、VEGF的表达，促肝癌血管正常化，延长血管正常化的时间。（2）动物实验结果显示癌痛消能降低肝细胞癌缺氧微环境中细胞因子HIF-1α、VEGF的基因和蛋白的过表达，提升细胞因子PHD2基因和蛋白的低表达；体外细胞实验也证实了癌痛消对缺氧微环境微血管内皮细胞中细胞因子HIF-1α、VEGF、PHD2的蛋白的表达均具有调节作用。研究结果提示癌痛消可以通过调节肿瘤缺氧微环境中细胞因子HIF-1α、VEGF、PHD2的表达起到抗种瘤血管新生进而发挥防治肝癌的作用，本课题进一步明确癌痛消方治疗原发性肝癌的作用以及机制，为肝癌的中医药治疗提供新的研究思路及方法，为抗肿瘤新药的研发提供良好的基础。