督脉电针与基因修饰MSCs移植联合应用治疗多发性硬化的实验研究

本项目在完成上一项国家自然科学基金课题的基础上，应用督脉电针促使多发性硬化动物模型脱髓鞘脊髓分泌更多的神经营养因子，通过这些局部微环境的变化：一方面促进脱髓鞘脊髓内移植的基因修饰骨髓间充质干细胞更多地分化为骨髓源性少突胶质细胞，参与髓鞘结构的重建；另一方面阻止受损伤的内源性少突胶质细胞进一步变性，促进少突胶质前体细胞向成熟少突胶质细胞分化，重建髓鞘结构，最终修复脊髓神经传导功能。研究出具有鲜明特色的祖国医学与现代再生医学相结合的治疗新策略，为临床治疗多发性硬化提供应用基础研究机理。如果本研究能达到预期目标，这预示多发性硬化病人将可通过电针督脉穴位和获取自体骨髓间充质干细胞移植联合应用策略进行治疗，避免机体对移植细胞的免疫排斥，更有效地修复脱髓鞘性脊髓损伤结构和功能。

多发性硬化（multiple sclerosis，MS）是中枢神经系统的脱髓鞘性疾病，目前还没有一种行之有效的药物治疗这种疾病。因此，预防脱髓鞘和少突胶质细胞变性对延缓或终止MS的病程发展是一个非常关键的问题，解决好这一问题可以形成一些新颖的治疗策略。本项研究假设：电针督脉穴位可能会促使脱髓鞘脊髓组织分泌神经营养素-3 (NT-3)，作用移植在脱髓鞘脊髓内NT-3受体 (TrkC) 基因修饰的骨髓间充质干细胞 (MSCs) 更多地分化为MSCs源性少突胶质细胞，参与髓鞘结构的重建，最终修复神经传导功能。.本研究结果显示：督脉电针联合过表达TrkC的MSCs移植治疗溴化乙啶 (ethidium bromide, EB) 诱导的大鼠脊髓脱髓鞘损伤15天及30天，皮质运动诱发电位（CMEP）的潜伏期和峰峰值均有明显改善；脱髓鞘脊髓组织的内源性NT-3水平增高；脱髓鞘区内发现有较多的MSCs源性少突胶质前体细胞和MSCs源性少突胶质细胞，新生髓鞘数目增多；可见MSCs源性少突胶质细胞包绕轴突形成髓鞘。此外，单纯督脉电针治疗EB诱导的大鼠脊髓脱髓鞘损伤23天后开始，其大鼠后肢活动功能有明显改善；在30天，脊髓诱发电位的潜伏期和峰峰值均有明显改善；脱髓鞘脊髓组织的内源性NT-3水平增高；内源性少突胶质前体细胞 (OPCs) 数量明显增高，有些细胞还表达TrkC；脱髓鞘区内发现有较多的内源性少突胶质细胞，有些细胞还包绕裸露的轴突，新生髓鞘数目增多。上述研究结果表明，应用督脉电针促使EB诱导的大鼠脱髓鞘脊髓组织分泌更多的神经营养素-3 (NT-3)，一方面促进脱髓鞘脊髓内移植的TrkC基因修饰的MSCs更多地分化为MSCs源性少突胶质细胞，参与髓鞘结构的重建；另一方面阻止受损伤的内源性少突胶质细胞进一步变性，促进表达TrkC的少突胶质前体细胞更多地向成熟少突胶质细胞分化，重建髓鞘结构，最终修复脊髓神经传导功能。.本项研究提示，督脉电针与过表达TrkC的MSCs移植联合应用是一种治疗脊髓脱髓鞘疾病的有效新策略。它具有鲜明特色的祖国医学与现代再生医学相结合的治疗策略，为临床治疗脊髓脱髓鞘疾病提供了应用基础研究机理。本研究已达到预期目标，这预示患有严重的脊髓脱髓鞘疾病患者将来可以通过电针督脉穴位和获取自体MSCs移植联合应用策略进行治疗，避免机体对移植异体细胞的免疫排斥，更有效地修复